Способы цервикального искусственного осеменения коров и их сравнительная оценка
Способы цервикального искусственного осеменения коров и их сравнительная оценка
1. ВРЕМЯ ОСЕМЕНЕНИЯ САМОК.
2. ТЕХНИКА ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ КОРОВ.
3. ПОДГОТОВКА РАБОЧЕГО МЕСТА ТЕХНИКА-ОСЕМЕНАТОРА.
4. СПОСОБЫ ЦЕРВИКАЛЬНОГО ОСЕМЕНЕНИЯ КОРОВ.
4.1. Визо-цервикальный способ осеменения коров
4.2. Ректо-цервикальный способ осеменения коров
4.3. Мано-цервикальный способ искусственного осеменения коров
Искусственное осеменение – крупнейшее достижение биологической науки ХХ века. В течение последних 50 лет искусственное осеменение является основным зоотехническим методом воспроизводства сельскохозяйственных животных.
Он широко используется как для контроля заболеваний скота, передающихся половым путем, так и для улучшения генетических показателей сельскохозяйственных животных.
Использование криоконсервантов для глубокого замораживания спермы позволило продлить жизнь спермиев, полученных от высокоценных племенных производителей.
Большой интерес представляет изучение морфологии и биохимии спермиев, рассмотрение влияния семенной плазмы на жизнеспособность спермиев, изучение механизмов акросомной реакции и капацитации спермиев.
Осеменение коров проводят тремя способами, при которых разбавленную сперму вводят в шейку матки (цервикальное осеменение).
1. ВРЕМЯ ОСЕМЕНЕНИЯ САМОК
Эффективность искусственного осеменения самок животных в значительной мере зависит от своевременного введения спермы. Причиной низкой оплодотворяемости часто бывает неумение выбрать время, наилучшее для осеменения.
Яйцеклетки при выходе из яичников сохраняют способность к оплодотворению всего лишь несколько часов. Поэтому для самок всех видов будет верным общее положение; проводить искусственное осеменение перед овуляцией как можно ближе к её началу.
У коров в отличие от самок других видов овуляция фолликулов происходит через 6-15 часов после угасания признаков половой охоты, поэтому их необходимо осеменять в конце половой охоты, которая длится 12-18 часов (зимой короче).
При проведении искусственного осеменения учитывают все их физиологические особенности, но они имеют видовые отклонения, которые следует знать при освоении разных способов осеменения маточного поголовья.
2. ТЕХНИКА ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ КОРОВ
Для искусственного осеменения коров-доноров необходимо использовать сперму только выдающихся быков-производителей, достоверно оцененных по качеству потомства. Надежным критерием наследственных качеств быка служит коэффициент повторяемости, т. е. коэффициент регрессии будущих дочерей быка на число фактически имеющихся дочерей. Если генетическое превосходство дочерей быка, выраженное величиной отклонения от сверстниц, умножить на коэффициент повторяемости, то полученная величина будет характеризовать генетическое превосходство будущих дочерей быка, или предсказанную разность. Предсказанная разность является одним из наиболее объективных качеств быка, разработанных в современной селекции молочного скота.
Для искусственного осеменения коров-доноров следует использовать, как правило, сперму производителей 1-й племенной категории, т. е. таких, племенная ценность которых превышает среднюю популяционную величину на два стандартных отклонения. В этом случае существенно повышаются темпы селекции, и улучшается племенная ценность новой генерации.
Племенной подбор быков-производителей и коров-доноров осуществляется по заказному или целевому спариванию родителей. В его основе должен лежать принцип индивидуального подбора в соответствии с селекционной программой совершенствования существующих или создания новых пород, типов и линий.
Требования к оценке оплодотворяющей способности спермы быков, предназначенной для осеменения коров-доноров, должна быть значительно выше, чем при оплодотворении остальных коров.
Для повышения оплодотворяемости, наряду с использованием высококачественной спермы, необходимо определить сроки половой охоты для своевременного проведения искусственного осеменения. Как правило, коров с гормонально вызванной половой охотой осеменяют дважды: первый раз при начале появления половой охоты и второй — через 12-24 часа.
Коров искусственно осеменяют дважды в день с интервалом 10-12 часов каждый раз двумя-тремя дозами замороженной спермы. Так как при суперовуляции повышается число овулировавших яйцеклеток, в каждой дозе спермы должно быть не менее 50 млн. подвижных спермиев.
После первого и второго осеменения коров рекомендуется выдерживать на привези или в стойле отдельно от стада до прекращения признаков охоты.
Коров, не проявивших охоту в течение 30-45 дней после отёла, а также коров многократно (два раза и более) приходящих в охоту, необходимо обязательно показать ветеринарным специалистам-гинекологам для установления причин и принятия мер к их оплодотворению.
3. ПОДГОТОВКА РАБОЧЕГО МЕСТА ТЕХНИКА-ОСЕМЕНАТОРА
Рабочее место техника-осеменатора готовится в следующей последовательности:
Снять верхнюю одежду, надеть проглаженный утюгом халат, косынку (колпак) и сапоги.
Проверить состояние дезоковрика, при необходимости залить его раствором 2%-ного едкого натрия.
Вымыть руки с мылом.
Осмотреть коров, карточки на которых помещены в карманчики календаря на данный период.
Предупредить доярок и скотников, какие коровы должны быть в охоте сегодня и завтра, а при наличии коров в охоте отвести их на пункт искусственного осеменения.
Включить плитку, поставить на нее колбу на 800 мл с дистиллированной водой, включить утюг.
В толстостенную чашку налить до половины теплой воды, взять кусок серой ваты и вымыть лабораторный и манежный столы, затем насухо вытереть их – вначале лабораторный, затем манежный.
Затем использованную вату поместить в мусорное ведро и вымыть руки.
Приготовить путем проглаживания полотенце и по две марлевые салфетки на одну корову.
Взять тампонницу, снять крышку, положить в нее тампоны, гладкой поверхностью вверх и пропитать 96% спиртом с помощью пинцета, перенести в тампонницу и закрыть крышкой.
Приготовление рабочих растворов:
Приготовить 2-3%-ный раствор бикарбоната натрия по 0,5 литра на одну корову, 500 мл 1%-ного раствора бикарбоната натрия, или 0,9%-ного раствора хлористого натрия, или 2,9%-ного раствора лимонно-кислого натрия (для этого в 100 мл дистиллированной воды растворить 1 гр двууглекислой (пищевой) соды, лимонно-кислого натрия 2,9).
Остудить, разлить растворы в банки под номером 1, 3, 4 (предварительно простирилизованные и пронумерованные) с притёртыми пробками.
Приготовить 70 раствор спирта путём добавления к 73 мл 96% спирта 27 мл прокипичённой дистиллированной воды; правильность приготовления раствора спирта проверить спиртометром и налить раствор в баночку под № 2.
Поставить на лабораторный стол баночки под № 1, 2, 3, 4, тампонницу со стерильными марлевыми салфетками и тампонницу с полувлажными спиртовыми тампонами; для отработанных растворов поставить шашку из толстого стекла.
Взять подставку для инструментов, обработать её спиртовым тампоном, затем протереть этим же тампоном стол и установить подставку; использованный тампон поместить в толстостенную чашку.
Вторым тампоном обработать наружную поверхность шприца катетера (тампон должен выходить на половину за канюлю шприца), затем двумя пальцами, вращательными движениями, обработать канюлю и продвинуть тампон до середины, затем, свернув тампон вдвое, обработать наружную поверхность до конца.
Третьим тампоном обработать пинцеты, стеклянную палочку, термометр и положить на подставку.
4. СПОСОБЫ ЦЕРВИКАЛЬНОГО ОСЕМЕНЕНИЯ КОРОВ
4.1. Визо-цервикальный способ осеменения коров
Для подготовки шприца – катетера к использованию перед осеменением необходимо иметь четыре нумерованные баночки с притертыми пробками. В баночке № 1, 3, 4 наливают свежеприготовленный стерильный 1%-ный раствор хлористого натрия. А в баночку № 2 — 70%-ный спирт – ректификат. Кроме того, надо приготовить баночку со стерильными марлевыми салфетками и баночку с полувлажными ватными тампонами, пропитанными 96%-ным спиртом, для фламбирования влагалищных зеркал, обработки наружной поверхности шприца-катетера и других инструментов. Перед началом работы вымытый и обеззараженный шприц-катетер отмывают от дезинфектора (70%-го спирта ректификата), набирая в шприц 3-4 раза 1%-ный раствор хлористого натрия из баночки № 3, а затем № 4.
Ухватив канюлю шприца стерильной марлевой салфеткой, движением поршня удаляют остатки хлористого натрия и набирают сперму для осеменения. Раствор в баночках № 3 и № 4 должен быть теплым (38-40°С) для нагревания шприца перед наполнением его спермой.
Остатки физиологического раствора из шприца можно удалить, держа его тонким концом вниз и передвигая несколько раз поршень. Набрав сперму, шприц поворачивать вертикально катетером вверх, движением поршня вниз втягивает сперму из катетера, а затем продвигает поршень вверх, вытесняют из цилиндра воздух до появления капли спермы на конце катетера.
Корову фиксируют в специальном станке и перед осеменением обмывают наружные половые органы с помощью тампона, чистой теплой водой из кружки Эсморха, орошают раствором фурацилина или фуразолидола, насухо вытирают, раскрывают половые губы и вводят обеззораженое фламбированием, охлаждённое стерильным физиологическим раствором теплое влагалищное зеркало (обычно с осветителем). Влагалищное зеркало вводят так, чтобы ручки были направлены в сторону, затем поворачиваем ручки вниз и открываем влагалищное зеркало.
Обнаружив визуально шейку матки, подготовленный шприц-катетер или осеменительную пипетку с баллончиком вводят через раскрытое влагалищное зеркало в шейку матки коровы на глубину 4-6 см., слегка оттягивают влагалищное зеркало назад и медленно, нажимая на поршень или баллончик, вводят сперму.
После этого шприц-катетер или осеменительную пипетку с баллончиком, а затем и влагалищное зеркало извлекают, предварительно провернув влагалищное зеркало в исходное положение – ручки в сторону с не полностью сомкнутыми ветвями (с тем, чтобы не ущемить слизистую оболочку влагалища).
По окончании работы шприц-катетер с начало тщательно отмывают от спермы (5-6 раз) раствором из баночки № 1, после чего дезинфицируют кипячением или 70%-ным спиртом из баночки № 2; спирт оставляют в цилиндре шприца-катетера и в таком состоянии шприц-катетер помещают на хранение в специальный шкаф.
При каждом промывании растворы из шприца-катетера выливают. Не следует во избежание загрязнения выливать обратно в баночку раствор, которым пользовались для промывания или дезинфицирования шприца-катетера.
Влагалищное зеркало после осеменения коровы моют тёплым 3%-ным раствором двууглекислой соды, затем обмывают прокипяченной тёплой водой, насухо вытирают и обеззараживают фламбированием или в кипящей воде.
Нельзя пользоваться при обмывании нескольких коров и той же ватой, марлей или поролоном, так как это может способствовать распространению заразных болезней.
При осеменении нескольких коров спермой одного быка наружную поверхность шприца-катетера после осеменения каждой коровы нужно обязательно продензифицировать ватным тампоном, пропитанным 96%-ным спиртом, тщательно обтереть скользящим движением по направлению к цилиндру, при необходимости обрабатывают и сам цилиндр шприца-катетера. После такой обработки можно осеменять этим шприцем-катетером следующую корову.
В настоящее время и при визо-цервикальном способе широко используют одноразовые осеменительные пипетки с баллончиком, особенно при осеменении размороженной спермой.
4.2. Ректо-цервикальный способ осеменения коров
Перед осеменением корову фиксируют в станке и делают туалет (обмывают наружные половые органы с помощью тампона, чистой тёплой водой из кружки Эсмарха, орошают раствором фурацилина или фуразолидона, насухо вытирают) наружных половых органов. Затем моют руки и дезинфицируют их раствором фурацилина или спиртом, обтирая тампоном, берут пакетик с пипетками, протирая его тампоном, смоченным 96%-ным спиртом, надрезают стерильными ножницами или прорывают концом пипетки уголок пакета.
Выдвинув пипетку на 1/3 длины, соединяют её с пустой стерильной ампулой, у которой предварительно срезают колпачок стерильными ножницами, или со стерильным шприцем при помощи резиновой или полиэтиленовой муфты, или с баллончиком, извлекают пипетку полностью. Надорванный пакетик с пипетками запаивают над пламенем спиртовки или спички сразу же после извлечения каждой пипетки.
Взяв ампулу со спермой протирают её тампоном, смоченным 96%-ным спиртом, срезают со стороны дна, после чего всасывают из неё сперму в пипетку, сжимая и отпуская пустую ампулу, соединенную с ней. Если сперма доставлена или разморожена (гранулы) во флаконах, то из флакона в пипетку набирают её 0,5-1,0 мл (сперму перед всасыванием в пипетку нужно смешать осторожным вращением ампулы или флакона).
Когда доставили в соломинках-капиллярах (пайеттах), то её размораживают, затем открытый конец капилляра с помощью полиэтиленовой муфты присоединяют к укороченной полистироловой пипетке, соединённой со шприцем, и прокалывают свободный конец стерильной иглой.
Подготовленные для осеменения инструменты кладут на стерильную подставку. Каплю спермы выдавливают на предметное стекло, сверху кладут покровное и определяют под микроскопом активность. Когда всё готово, большим и указательным пальцами одной руки, одетой в полиэтиленовую перчатку, раскрывают у животного срамные губы и не касаясь пипеткой наружных половых органов, вводят её другой рукой во влагалище до соединения со шприцем (ампулой, баллончиком).
После введения пипетки во влагалище, руку в полиэтиленовой перчатке увлажняют тёплой водой и вводят в прямую кишку, несколько отведя пипетку другой рукой в сторону. Если пипетка на своём пути к влагалищной части шейки попадает в складку влагалища, то шейку матки рукой, введенной в прямую кишку, подвигают несколько вперед (к голове животного), что приводит к натяжению стенок влагалища и распрямлению складок.
Убедившись, что конец пипетки лежит вблизи отверстия шейки матки, приступают к исследованию матки и яичников. Если при исследовании устанавливают беременность или отмечают ненормальности в половых органах, то осеменять животное не следует. Окончательный диагноз должен поставить ветеринарный специалист.
Следует иметь в виду, что шейку матки нельзя фиксировать в период напряжения кишечной стенки, так как возможно травмирование её слизистой оболочки или прободение. Ослабление напряжения достигается лёгким поглаживанием слизистой оболочки.
После исследования, влагалищную часть шейки матки фиксируют всей кистью руки. При этом отверстие шейки матки нащупывают мизинцем или большим пальцем и под его контролем направляют пипетку. Убедившись, что пипетка попала в отверстие, осторожно лёгкими вращательными движениями, чтобы не повредить поперечных складок слизистой оболочки, шейку матки как бы натягивают на пипетку. Введя пипетку на глубину 6-8 см, медленно надавливают на ампулу или поршень шприца-катетера, одновременно несколько оттягивая пипетку назад. Затем, не разжимая ампулу пальцами или не вытягивая поршень, пипетку осторожно извлекают из влагалища, а руку из прямой кишки.
Нельзя при фиксации захватывать тело матки, а не саму шейку матки; влагалищная часть шейки матки в этом случае опускается вниз, и конец пипетки трудно ввести в её отверстие.
При отсутствии одноразовых пластмассовых инструментов можно применять стеклянные пипетки с резиновыми баллончиками и резиновые перчатки. Все эти предметы после употребления тщательно отмывают и стерилизуют в кипящей воде.
4.3. Мано-цервикальный способ искусственного осеменения коров
Мано-цервикальный способ заключается в том, что сперму при помощи полиэтиленовой ампулы, соединённой со стерильным укороченным полистироловым катетером, вводят глубоко в шейку матки коровы непосредственно рукой, защищенной стерильной полиэтиленовой перчаткой. Катетер представляет собой трубку с оплавленным концом из прозрачного полистирола или полиэтилена, не токсичных для спермы; длина его 75 мл, наружный диаметр 4,8 мм. Катетеры упаковывают в полиэтиленовые перчатки и стерилизуют; остальные предметы те же, что и при ректо-цервикальном способе.
Ампулу со спермой извлекают из термоса, протирают тампоном, смоченным 96%-ным спиртом, осторожно встряхивают, чтобы хорошо перемешать в ней сперму. Отрезают колпачок стерильными ножницами, выдавливают каплю спермы на предметное стекло для определения активности спермиев, затем соединяют ампулу с катетером, не вынимая его из упаковочного полиэтиленового пакетика.
После туалета наружных половых органов коровы надевают перчатку, смачивают её стерильным физиологическим раствором, осторожно вводят руку во влагалище коровы и пальцами делают лёгкий массаж шейки матки. Вызвав сокращение матки, не вынимая кисти руки из влагалища, другой рукой подают подготовленную для осеменения ампулу со вставленным катетером. Для удобства в работе катетер располагают вдоль среднего пальца и прижимают большим. Не меняя положения ампулы, вводят кисть руки до шейки матки и вставляют под контролем указательного пальца катетер на глубину 1,5-2 см. в канал шейки матки.
Массируя шейку матки кончиками пальцев, подталкивают ампулу ладонью до тех пор, пока катетер полностью (на 7см) не войдет в канал шейки матки. После этого приподнимают ампулу вверх на 2 см (угол наклона 15-20°) и выдавливают из неё сперму большим и указательным пальцами. Сдавливать ампулу нужно вначале у донышка, затем перемещать давление по направлению к шейке ампулы, чтобы полностью выдавить сперму из ампулы и катетера. Этот приём необходимо предварительно отрабатывать.
Шейка матки при массаже периодически сокращается, поэтому сперму следует выдавливать из ампулы в момент расслабления шейки матки и всасывающего действия матки. Если шейка матки перестала сокращаться, следует осторожно подвигать катетером из стороны в сторону или назад и вперёд. При возобновлении сокращений сперма выдавливается легко.
После введения спермы в канал шейки матки, не разжимая ампулы, надо осторожно вынуть катетер и помассировать шейку матки не вынимая руку из влагалища.
Коров и телок осеменяют цервикальным методом, при котором сперму вводят в канал шейки матки посредством различных инструментов в зависимости от метода осеменения.
В настоящее время применяют три способа цервикального осеменения маток: визуальный (посредством шприца-катетера с визуальным контролем через влагалищное зеркало); мано-цервикальный (введение осеменительного инструмента в шейку матки рукой); ректо-цервикальный (введение пипетки или шприца в цервикальный канал под контролем руки ведением в прямую кишку).
Последний способ наиболее рекомендуем в практике искусственного осеменения животных, так как имеет ряд существенных преимуществ по сравнению с другими способами введения спермы в половые пути самок крупного рогатого скота.
Искусственное осеменение коров проводят обязательно при наличии у них половой охоты.
Осеменяют коров обычно дважды в одну охоту: первый раз – сразу после выявления у них половой охоты и второй раз – через 10-12 часов; однократное осеменение допускается только при ректальном контроле фолликулов или когда рефлекс неподвижности недавно угас.
1. Валюшкин , гинекология и биотехника размножения животных / , . — Мн., 2001.
2. Завертяев в воспроизводстве и селекции крупного рогатого скота. — Л., 1989.
3. Заянчковский по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных / , . — М., 1975.
4. Инструкция по искусственному осеменению и воспроизводству стада в скотоводстве. — Мн., 1999.
5. Кузьмич акушерство и гинекология животных. — Витебск, 2002.
6. Прокофьев размножения сельскохозяйственных животных. — Л., 1983.
7. Шипилов по акушерству, гинекологии и искусственному осеменению сельскохозяйственных животных / , , и др. — М., 1988.
8. Kenneth, L. W. Embryo Cultivation // Biotechnology Magazine vol.1 #2, 1994.
9. Schaeffer, L. R. Effects of embryo transfer in beef cattle on genetic evaluation methodology // Journal of animal science. Oct 1989. v.
10. Sertich, P. L. Transcervical embryo transfer in performance mares // Journal of the American Veterinary Medical Association. Oct 1, 1989. v.
11. Shelton, J. N. Embryo manipulation in research and animal production. // Australian journal of biological sciences. 1988. v.
Источник
