Способы подсчета количества тромбоцитов диагностическое значение тестов

5. Методика определения количество тромбоцитов. Диагностическая трактовка.

Существуют следующие методы определения количества тромбоцитов в единице объема крови:

1) методика Фонио;

2) подсчет в камере Бюркера с сеткой Горяева;

3) использование фазоконтрастной и люминисцентной микроскопии;

4) электронно-автоматический метод (счетчики «Культер», «Целлоскоп»).

Для подсчета тромбоцитов периферической крови ча­ще всего применяют методику Фонио.

Оборудование и реактивы:

1) 14% раствор магния сульфата.

Ход исследования: для предупреждения склеивания тромбоцитов предварительно на место укола пальца нано­сят каплю 0,14 % раствора магния сульфата и через нее де­лают прокол. Выступившую каплю крови смешивают с каплей магния сульфата и делают мазок, который окра­шивают по Романовскому—Гимзе. Затем в мазке под мик­роскопом с иммерсионной системой одновременно подсчи­тывают 1000 эритроцитов и находящиеся среди них тром­боциты. Последние встречаются в препарате либо в оди­ночку, либо чаще разбросаны кучками между эритроцита­ми. По величине тромбоцит занимает приблизительно 1/3-1/4 эритроцита. Тромбоциты не имеют ядра и их ци­топлазма окрашена в синеватый цвет с красноватым от­тенком в центре. Зная содержание эритроцитов в 1 л кро­ви, легко вычисляют абсолютное количество тромбоцитов.

Нормальное количество тромбоцитов в периферической крови: 180.0 – 320.0 х 10 9 /л. (150-450 х 10 9 /л согласно рекомендациям ВОЗ).

Интерпретация полученных данных.

Причины увеличения числа тромбоцитов (тромбоцитоза).

Миелопролиферативные заболевания — хронический миелолейкоз, эритремия, эссенциальная тромбоцитемия.

Воспалительные процессы – острая ревматическая лихорадка, ревматоидный артрит и др.

Злокачественные опухоли — лимфогранулематоз, рак.

Острая кровопотеря и гемолитические анемии.

Причины уменьшения количества тромбоцитов (тромбоцитопении).

Врожденные (синдром Вискотта-Олдрича и др.) и приобретенные (идиопатическая иммунная тромбоцитопеническая пурпура, СКВ и др.), иммунодефициты.

Апластическая, витамин-В₁₂-фолиеводефицитная, тяжелая железодефицитная анемии.

Вирусные инфекции, риккетсиозы, малярия.

«Синие» врожденные пороки сердца, застойная сердечная недостаточность.

Лекарственные воздействия (цитостатики).

6. Методика сбора мокроты.

Мокротой называется патологический секрет, выделяемый с кашлем из дыхательных путей. Мокрота собирается в чистую широкогорлую стеклянную посуду с закручивающейся крышкой в утренние часы при кашле, после тщательного полоскания рта и горла, до приема пищи. Собирать мокроту за сутки и больше нецелесообразно, так как длительное стояние ведет к размножению флоры и аутолизу клеточных элементов. При необходимости мокроту сохраняют в прохладном месте (в холодильнике).

Источником наиболее ценной информации является содержимое трахеобронхиального дерева, полученное при бронхоскопии (промывные воды бронхов).

7. Исследование мокроты: макроскопическое, микроскопическое, бактериоскопическое. Понятие о бактериологическом методе исследования мокроты.

При макроскопическом изучении обращают внимание на: характер мокроты, количество, цвет, запах, консистенцию, слоистость, наличие различные включений.

Характер мокроты определяется ее составом.

Слизистая – состоит из слизи (продукта слизистых желез дыхательных путей). Выделяется при острых бронхитах, разрешении приступа бронхиальной астмы.

Слизисто-гнойная – представляет смесь слизи и гноя, причем слизь преобладает, а гной включен в виде комочков или прожилок. Наблюдается при хронических бронхитах, бронхопневмонии.

Гнойно-слизистая – содержит слизь и гной (преобладание гноя, слизь имеет вид тяжей). Характерна для хронических бронхитов, бронхоэктазии, абсцедирующей пневмонии.

Гнойная – не имеет примеси слизи и появляется в случае открытого в бронх абсцесса легкого, при прорыве эмпиемы плевры в бронх.

Слизисто-кровянистая – состоит из слизи с прожилками крови или кровяного пигмента. Отмечается при катарах верхних дыхательных путей, бронхогенном раке, пневмонии.

Слизисто-гнойно-кровянистая – содержит слизь, гной и кровь, чаще равномерно перемешанные между собой. Появляется при бронхоэктазах, туберкулезе, актиномикозе легких, бронхогенном раке.

Кровавое отделяемое (кровохаркание) – встречается при туберкулезе, опухолях бронхов и легкого, ранении легкого, актиномикозе.

Серозное отделяемое – характерно для отека легких, представляет собой пропотевшую в полость бронхов плазму крови.

Количество мокроты (величина отдельных порций и суточные количества) зависят от характера заболевания и от способности больного к отхаркиванию.

Скудное количество мокроты – характерно для воспаления дыхательных путей (трахеит, острый бронхит в начальной стадии, бронхиальная астма, бронхопневмония).

Обильное количество мокроты (от 0.5 до 2 л) выделяется обычно из полостей легочной ткани, бронхов (бронхоэктатическая болезнь, абсцесс легкого, прорыв эмпиемы), при повышенном кровенаполнении легких и пропотевании в легкие и бронхи большого количества плазмы крови (отек легких).

Цвет и прозрачность мокроты зависят от ее характера и от состава вдыхаемых частиц.

Слизистая мокрота – стекловидная, прозрачная; слизисто-гнойная – стекловидная с желтым оттенком; гнойно-слизистая – желто-зеленоватая; гнойная – желто-зеленая; слизисто-кровянистая – стекловидная с кровянистым или ржавым оттенком; слизисто-гнойно-кровянистая – стекловидная с желтыми комочками, прожилками красного цвета или ржавыми оттенками; отделяемое при легочном кровотечении – жидкое, красного цвета, пенистое; при распаде опухоли легкого может наблюдаться мокрота в виде «малинового желе»; отделяемое при отеке легких – жидкое, прозрачно-желтое с опалесценцией, пенистое и клейкое.

Мокрота с инородными примесями имеет цвет этих примесей: белая у мукомолов, черная у шахтеров и др.

Запах у мокроты появляется при длительном стоянии, а также при задержке мокроты в бронхах или полостях в легком и обусловлен деятельностью бактерий, вызывающих гнилостный распад белков. Свежевыделенная мокрота обычно не имеет запаха. Мокрота имеет неприятный запах при бронхоэктатической болезни, абсцессе легкого, туберкулезе, злокачественных новообразованиях с некрозом; зловонный (гнилостный) запах отмечается при гангрене легкого.

Консистенция тесно связана с характером мокроты и может быть вязкой, густой и жидкой. Вязкость зависит от содержания слизи и от количества форменных элементов — лейкоцитов, эпителия. Наиболее вязкая мокрота обнаруживается при муковисцидозе и бронхиальной астме.

Слоистость мокроты. При бронхоэктазах, гнилостном бронхите, абсцессе и гангрене легкого мокрота при стоянии разделяется на три слоя: на дне посуды находятся тяжелые элементы мокроты – гной и детрит, образующийся вследствие распада легочной ткани; средний слой составляет серозная жидкость; в верхнем – плавающие частицы, содержащие воздух и слизь.

Включения, патологические элементы, паразиты в мокроте обнаруживают путем ее рассмотрения в чашке Петри на белом или черном фоне, используя лупу.

В мокроте можно выявить:

1) спирали Куршмана – штопорообразно извитые трубчатые тела, имеющие диагностическое значение при бронхиальной астме;

2) фибринозные свертки – древовидно разветвленные образования эластичной консистенции, имеющие значение при фибринозном бронхите, реже — при крупозной пневмонии;

3) рисовидные тельца (линзы Коха) – плотные образования творожистой консистенции, состоящие из детрита, туберкулезных палочек и эластических волокон; обнаруживаются при кавернозном туберкулезе легких;

4) гнойные пробки Дитриха – состоят из детрита, бактерий, кристаллов жирных кислот, встречаются при гангрене легкого;

5) дифтеритические пленки;

6) некротизированные кусочки легкого;

7) частицы опухоли легкого;

8) друзы актиномицетов;

9) элементы эхинококка;

10) случайно попавшие из полости инородные тела (семена подсолнечника и др.).

Микроскопическое исследование мокроты.

Микроскопическое исследование мокроты проводят в свежих неокрашенных и фиксированных окрашенных препаратах.

Элементы мокроты, которые обнаруживаются в нативном препарате, можно разделить на три основные группы.

Клеточные элементы – плоский эпителий (одиночные клетки встречаются всегда, множественные – при воспалительных явлениях в ротовой полости); цилиндрический эпителий (встречается при остром катаре верхних дыхательных путей, остром бронхите, бронхиальной астме); макрофаги «жировые шары» (встречаются при раке легкого, туберкулезе, актиномикозе), сидерофаги – «клетки сердечных пороков», макрофаги с гемосидерином (обнаруживают при застое в малом круге кровообращения, при инфаркте легкого), кониофаги – пылевые макрофаги (характерны для пневмокониозов и пылевых бронхитов); опухолевые клетки; лейкоциты (в слизистой мокроте – единичные, в гнойной – покрывают все поля зрения); эритроциты (единичные могут быть в любой мокроте, окрашенной кровью).

Волокнистые образования – эластические волокна, которые указывают на распад легочной ткани при туберкулезе, абсцессе, опухоли, коралловые волокна (отложение на эластичном волокне жирных кислот и мыл) и обызвествленные волокна (пропитанные солями извести); фибринозные волокна (при фибринозном бронхите, крупозной пневмонии, иногда при актиномикозе); спирали Куршмана.

Кристаллические образования – кристаллы Шарко-Лейдена (продукт кристаллизации белков распавшихся эозинофилов, встречается при бронхиальной астме, глистных поражений легких), кристаллы гематоидина (обнаруживаются при кровоизлияниях в легочную ткань, в некротизированной ткани), кристаллы холестерина (встречаются при задержке мокроты в полостях – туберкулез, абсцесс, эхинококкоз); кристаллы жирных кислот – также образуются при застое мокроты в полостях легкого.

Окраску препаратов производят с целью изучения клеток крови в мокроте и для бактериологического исследования.

Для изучения клеток крови в мокроте применяют способ окрашивания по Романовскому-Гимзе. При этом способе окраски удается дифференцировать клетки лейкоцитарного ряда, эритроциты, однако, наибольшее значение имеет выделение эозинофилов (эозинофилия мокроты свойственна для бронхиальной астмы, глистного поражения легких, эозинофильной пневмонии).

Бактериоскопическое исследование мокроты с окраской по Грамму имеет ориентировочное значение для выявления грамм-положительной и грамм- отрицательной микрофлоры. Окраска по Цилю-Нильсену производится с целью обнаружения микобактерий туберкулеза.

В случае, когда при бактериоскопии из-за малого количества микобактерий туберкулеза обнаружить из не удается, прибегают к ряду дополнительных исследований (люминесцентная микроскопия, методы накопления бактерий – флотация и электрофорез).

Иногда в окрашенном препарате можно выявить различные виды грибов – аспергиллы, кандиды, актиномицеты.

Бактериологическое исследование мокроты.

Бактериологический метод позволяет выделить возбудителя заболевания в чистом виде при посеве мокроты на питательные среды, определить вирулентность и лекарственную устойчивость (чувствительность) выделенного микроорганизма, что необходимо для рационального подбора антибактериальных средств. В некоторых случаях производят заражение экспериментальных животных мокротой, полученной от больного человека.

Источник

Подсчет тромбоцитов по Фонио

Общий анализ крови позволяет получить ценную диагностическую информацию. Часто в лабораториях используют автоматические гематологические счетчики, позволяющие оценить количество лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов и некоторых других форменных элементов крови. Несмотря на удобство проведения автоматического подсчета, наиболее информативными считаются методы микроскопического исследования. Один из них – тромбоциты по Фонио.

Что такое тромбоциты

Тромбоцитами называют безъядерные клетки крови, которые синтезируются тканями красного костного мозга. Цикл их жизнедеятельности составляет около 7 суток, после чего они утилизируются в печени и селезенке. У тромбоцитов процесс старения выражен более, чем у других форменных элементов крови.

Как и другие составляющие крови, тромбоциты делятся на молодые, зрелые и старые. У здорового человека количество зрелых клеток не должно превышать 95%. Если при анализе обнаруживается большая концентрация молодых телец, это свидетельствует о развитии некоторых заболеваний, среди которых можно назвать многочисленные повреждения кровеносных сосудов и прочее. Кроме молодых, в плазме крови нередко обнаруживаются старые тромбоциты. Такое явление говорит о нарушении процесса производства и утилизации клеток.

Роль в организме

Тромбоциты принимают активное участие в процессах, связанных с образованием тромбов. Они также производят специальное вещество, необходимое для регенерации тканей, стимуляции деления клеток, регулировки уровня проницаемости клеточных мембран и поддержания эластичности сосудов.

Ценное значение количественный и качественный состав тромбоцитов имеет при диагностике заболеваний сердца и сосудов. Высокое количество этих телец называется тромбоцитозом, пониженное – тромбоцитопенией.

В чем заключается метод Фонио

Подсчет тромбоцитов по Фонио – это анализ, помогающий выявить точное количество этих телец в крови, диагностировать многие заболевания у человека. При этом подсчет тромбоцитов осуществляется в мазке крови на тысячу эритроцитов, после чего это число пересчитывается в соотношении на 1 микролитр или литр. Методика считается очень точной, применяется для диагностики многих патологий.

Для проведения анализа кровь берется из пальца. Общее количество тромбоцитов в единице крови называется коагулограммой. Этот вид исследования назначают каждому пациенту, ведь анализ помогает заподозрить и выявить многие болезни.

Подготовка к анализу

На результат анализа тромбоцитов по Фонио могут повлиять некоторые факторы. В связи с этим необходимо правильно подготовиться к сдаче крови. Пациенту накануне перед забором биологического материала следует учесть следующие рекомендации:

• сдача крови должна проводиться через 8 часов после последнего приема пищи, так как многие продукты способны повлиять на цветовой показатель форменных элементов крови;
• накануне перед анализом нельзя заниматься спортом. Если человек выполнял любые физические нагрузки, результат исследования может быть неточным;
• забор материала осуществляется в утреннее время;
• наиболее точную информацию можно получить при сдаче крови повторно. Это помогает проследить за концентрацией тромбоцитов в динамике.

Кроме этого, врачу следует обязательно сообщить, принимались ли до этого какие-либо медикаментозные средства. Многие лекарства также способны исказить результат.

Подсчет тромбоцитов по Фонио

При подсчете тромбоцитов лаборант применяет несколько видов реактивов. Это этилендиаминтетраацетат натрия или сульфат магния. Реактивы берутся с помощью пипетки СЕЭ-метра.

Анализ проводится в несколько этапов:

1. В пробирку добавляют один из реактивов и кровь с помощью пипетки. Количество реактива берется до отметки 75, объем крови – до отметки К.
2. Полученную массу хорошо перемешивают и используют для изготовления мазков.
3. Если применяется магния сульфат, мазок окрашивается по методу Романовского-Гимзе на протяжении 120 минут и 45 минут, если лаборант берет этилендиаминтетраацетат натрия. При этом тромбоциты окрашиваются в фиолетово-розовый цвет.

С помощью микроскопа производится подсчет тромбоцитов и эритроцитов до тысячи красных телец крови. Чтобы узнать количество тромбоцитов, их умножают на число эритроцитов в 1 микролитре, после чего делят полученную цифру на тысячу. Получить наиболее достоверные результаты помогает специфический окрас исследуемых клеток. Именно поэтому многие специалисты при постановке диагноза используют метод подсчета тромбоцитов по Фонио.

Преимущества методики

Способ подсчета эритроцитов по Фонио успешно применяется многими врачами на протяжении многих лет. Техника имеет ряд преимуществ, среди которых выделяют:

• при рассмотрении крови под микроскопом лаборант четко видит исследуемый материал, цвет, форму, число клеток;
• при необходимости анализ можно проводить в любое время суток;
• метод прост в использовании, что связано с простой формулой, но в то же время очень информативен.

О чем могут свидетельствовать низкие показатели

Тромбоцитопения или пониженная концентрация эритроцитов в крови у человека свидетельствует о развитии различных нежелательных состояний. К наиболее частым причинам низких показателей относят:

• радиационное облучение больного;
• воздействие на организм свинца и прочих вредных веществ;
• патологии системы кроветворения;
• коллагенозы у пациента (совокупность заболеваний, касающихся соединительной ткани);
• наследственную предрасположенность;
• хронический нефрит.

У больных с тромбоцитопенией наблюдаются такие клинические проявления, как частые носовые кровотечения, кровоточивость десен, подкожные геморрагии. У женщин заболевание проявляется в виде обильных и длительных месячных.

Лечение такого состояния подразумевает устранение основной причины, повлекшей за собой нарушение. При этом используется терапия с помощью медикаментозных средств. В особо тяжелых случаях проводится удаление селезенки или трансплантация костного мозга.

Причины повышенных показателей

При повышении числа рассматриваемых клеток на единицу крови речь идет о тромбоцитозе. Как правило, это вторичная патология, возникающая на фоне следующих состояний:

• лечение с помощью некоторых медикаментов;
• перенесенное оперативное вмешательство;
• удаление селезенки;
• обильные кровопотери;
• воспаление оболочки головного мозга;
• патологии почек и печени;
• развитие онкологических образований;
• железодефицитная анемия.

Норма клеток у различных групп населения

При проведении анализа по методу Фонио используется норма от 120 до 400 тыс. клеток в кубическом миллиметре исследуемого материала. Колебание границ зависит от возраста пациента и его половой принадлежности. У женщин, мужчин и детей отклонения в пределах этих границ считаются нормой.

• дети до года – от 100 до 420 тыс. на мм 3 ;
• дети от года – от 180 до 320 тыс. на мм 3 ;
• мужчины – от 180 до 400 тыс. на мм 3 ;
• женщины от 180 до 340 тыс. на мм 3 .

У подростков уровень тромбоцитов может снижаться до 70 тыс. на мм3. У мужчин максимальное количество этих телец отмечается в возрасте 40 лет. Такие отклонения обязательно учитываются при постановке диагноза, объясняются физиологическими и возрастными особенностями организма.

Что влияет на уровень тромбоцитов в крови

Уменьшение или рост рассматриваемых клеток не всегда свидетельствует о развитии какой-либо патологии. Иногда уровень этих телец колеблется вследствие интенсивных и регулярных физических нагрузок, при неправильном питании. Многим людям может показаться странным тот факт, что при потере крови уровень тромбоцитов возрастает. Это объясняется попыткой организма компенсировать потерю крови повышенной выработкой ее форменных элементов.

Часто показатели повышены у людей, употребляющих алкоголь на протяжении длительного времени. Нарушается норма тромбоцитов во время приема медикаментов с тромбоцитопеническим действием. Повлиять на результаты анализа может даже безобидное кровотечение из носа.

Методы нормализации показателей

Первое, что нужно сделать при обнаружении повышенных или пониженных показателей тромбоцитов в крови, это провести дальнейшее обследование пациента с целью выявления патологии, повлекшей за собой такое состояние. Главный метод терапии тромбоцитопении и тромбоцитоза – борьба с первопричиной. Если же нарушение развивается по безобидным причинам, повысить количество тромбоцитов можно с помощью таких способов:

• отказаться от вредных продуктов, исключить из рациона алкогольные напитки, красный виноград, зеленый чай, чернику, томаты;
• включить в ежедневный рацион яблоки, гречневую кашу, рыбные блюда, болгарский перец, печень;
• по назначению специалиста принимаются специальные медикаментозные средства;
• повысить количество клеток помогут витамины группы А, В и С.

Понизить концентрацию рассматриваемых элементов крови поможет отказ от экстремальных видов спорта, адекватная оценка стрессовых ситуаций, избегание конфликтов дома и на работе.

Для снижения тромбоцитов специалисты рекомендуют выполнять следующие правила:

• принимать ацетилсалициловую кислоту в соответствии с назначением лечащего врача;
• исключить из питания шиповник, гранат, манго и другие блюда, которые повышают уровень тромбоцитов;
• пить препараты магния курсами несколько раз в год;
• употреблять не менее полутора литров воды в сутки.

Подсчет тромбоцитов по методу Фонио – это один из наиболее точных методов исследования крови. С помощью такого анализа врач может выяснить многие патологии, подобрать соответствующее лечение для пациента. Проводится этот анализ также с профилактической целью, что необходимо для ранней диагностики заболеваний и недопущения развития серьезных последствий на их фоне.

Источник