Способы фиксации лабораторных животных

Фиксация, методы заражения и взятия крови у лабораторных животных

Фиксация животных. При заражении лабораторных животных приме­няют различные, в зависимости от вида животных и метода введения мате­риала, способы фиксации. Для этой цели предложено довольно большое ко­личество всякого рода станков, досок-фиксаторов и т.п., но в обычной диа­гностической работе вполне можно обойтись без подобных приспособлений. Исключение составляет только заражение кроликов в мозг или под твердую мозговую оболочку, когда необходим фиксирующий столик.

В обычных условиях фиксация животных производится следующим об­разом. Кроликов помещают на стол в левом боковом положении, головой вправо от оператора. В этот момент фиксируют кролика правой рукой за кожную складку на спине; левую же руку ладонью вверх подводят под жи­вот кролика, ближе к задним конечностям. Затем захватывают между ука­зательными средним пальцами левое бедро (возможно выше), а большой па­лец охватывает тело животного со стороны правого паха. Приподняв заднюю часть животного и, освобождая правую руку, подводят ее (ладонью вверх) под грудную клетку позади передних конечностей. Затем захватывают ука­зательным и средним пальцами выше локтя левую ногу, а большим пальцем охватывают грудь в области правой подмышки так, чтобы правая нога была вынесена вперед. После этого кролика снимают со стола и вытягивают во всю длину.

Для внутривенных инъекций удобнее всего завертывать («пеленать») кролика в кусок плотного материала, предварительно подогнув ему ноги под живот; голову кролика оставляют свободной. Животное при этих спосо­бах фиксации держит помощник. Для этой цели существуют также специаль­ные закрытые ящики (боксы) с отверстием только для головы.

Туловище кролика плотно зажимают между коленями или прижимают локтем левой руки, оставляя свободной для проведения необ­ходимых манипуляций голову животного, повернутую вправо.

Фиксация головы кролика. Для этого удобно пользоваться боксом (рис.8), имеющим вид ящика с верх­ней выдвижной крышкой. Передняя стенка ящика состоит из двух частей: укрепленной неподвижно нижней, и выдвигающейся верхней. Посередине передней стенки имеется круг­лое отверстие диаметром 5 см, состоящее из двух половин: одна половина вырезана на нижней, другая—на верхней вы­двигающейся части передней стенки. Через это отверстие выводят наружу и фиксируют голову кролика. В задней ча­сти ящика с внутренней стороны на обеих боковых стенках набито по нескольку вертикальных планок, между которыми находятся пазы. Вставляя вертикально фанерную дощечку в тот или иной паз, можно увеличивать или уменьшать дли­ну бокса.

Рис. 8. Бокс для фиксации головы кролика.

Длина бокса 40 см, ширина 15 см, высота 15,5 см (высо­та нижней передней стенки 9 см, верхней—6,5 см). Фикса­ция кролика в боксе описанной конструкции осуществляется следующим образом. Выдвигают верхнюю крышку бокса и вынимают верхнюю половину передней стенки. В ящик са­жают кролика так, чтобы шея его проходила через выемку нижней половины передней стенки, после чего голову живот­ного фиксируют, опуская на нее верхнюю половину передней стенки. В один из пазов вдвигают фанерную дощечку; ограничивая тем самым возможность движений кролика в ящике, а затем закрывают верхнюю крышку, которая фикси­рует подвижную часть передней стенки.

Фиксация кролика и других лабораторных животных (морские свинки, крысы) в лежачем поло­жении на спине или животе. Для фиксации кроли­ков и других животных (морские свинки, крысы) в лежачем положении на спине или животе пользуются специальными станками. Наиболее просто устроенный станок представляет собой обычную доску на низких ножках, по размерам соот­ветствующую тому или другому виду животного. На ребрах боковых сторон доски имеется по 2 крючка или петли. У од­ного из узких краев находится приспособление для фикса­ции головы животного—головодержатель. Он представляет собой надеваемое на голову животного кольцо, соединенное со штативом. При помощи винтов высоту кольца на стойке штатива можно регулировать.

Животное кладут в удобном для опыта положении, спи­ной или животом кверху. Все 4 лапы продевают в петли, сделанные из бинта, которые затем плотно затягивают. Сво­бодные концы тесемок из бинта (в первую очередь от перед­них лап и во вторую—от задних) привязывают к крючкам или петлям доски. Фиксацию животного к станку производят с помощником.

Фиксация морской свинки руками. Морскую свинку брюшком кверху или наружу (рис. 9) берут левой рукой так, чтобы II палец находился под шеей, а I и III паль­цы—под передними конечностями животного. Правой рукой свинку поглаживают по животу до тех пор, пока она не успокоится, и только после этого приступают к намеченной операции, придерживая задние лапы животного правой рукой.

Рис. 9. Фиксация морской свинки руками

Фиксация крыс. Складку кожи в области затылка захватывают корнцангом, плотно прижимая голову живот­ного к поверхности стола. Другой рукой берут хвост крысы и, приподняв ее над поверхностью стола, держат в таком по­ложении, чтобы голова слегка оттягивалась корнцангом (рис. 10).

Рис. 10. Фиксация крысы корнцангом

Фиксация мышей. Мышь пускают по столу, придер­живая ее I и II пальцами правой руки за кончик хвоста. Когда, продвигаясь в каком-либо направлении, мышь натя­нет хвост, быстрым движением левой руки хватают ее за складку кожи в области затылка, ближе к ушам, чтобы она не могла поворачивать голову (рис. 11, а). Подняв мышь над столом, по­мощник держит ее на весу одной рукой за хвост, другой—за складку кожи на затылке, несколько растягивая в поло­жении, удобном для экспериментатора.

Рис. 11. Фиксация мыши

Работать с мышами можно и без помощника, фиксируя их левой рукой: I и II пальцами левой руки животное за­хватывают за складку кожи в области затылка, а остальны­ми 3 пальцами, прижав их к запястью, придерживают хвост и кожу в области крестца (рис. 11, б). При таком способе фиксирования правой свободной рукой можно производить различные опе­рации.

Способы заражения

В зависимости от цели исследования пользуются различ­ными способами заражения: внутрикожным, подкожным, внутримышечным, внутрибрюшинным, внутривенным, пероральным или интраназальным и др. При перечисленных способах, за исключением перорального и интраназального, заражение осуществляется с помощью шприца.

Взвесь микробной культуры, эмульсию из зараженных ор­ганов или кровь больного осторожно набирают в шприц, по­сле чего конец иглы закрывают кусочком ваты, смоченным 5% раствором хлорамина, 5% раствором карболовой кисло­ты или спиртом. Повернув шприц иглой кверху, осторожно выпускают из него пузырьки воздуха. Загрязненную вату бросают в банку с дезинфицирующим раствором.

Источник

Способ фиксации мелких лабораторных животных в положении на спине на операционном столе

Владельцы патента RU 2303421:

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине и патологической физиологии. Способ заключается в размещении наркотизированного мелкого лабораторного животного на устройстве, содержащем основание с подставочными упорами и направляющими, повторяющими контуры размещенного на спине данного вида животного с раскинутыми в стороны передними и задними лапами, его головы. После чего обертывают конечности, туловище и голову вместе с направляющими липкой лентой. Способ позволяет повысить надежность фиксации и удобство работы. 2 ил.

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине и патологической физиологии.

При моделировании терминальных состояний, проведении реанимационных мероприятий, при различных экспериментальных операциях под наркозом возникает настоятельная необходимость в фиксации мелких лабораторных животных на операционном столе.

Известны различные способы фиксации мелких лабораторных животных. Пользуются способом применения универсальной камеры из плексигласа А.Х.Когана (И.П.Западнюк, В.И.Западнюк и др. «Лабораторные животные». «Вища школа» 1983, стр.258). Для фиксации крыс предложен ряд других способов применения специальных приспособлений — гильз из проволочной сетки, цилиндров. Используют также заворачивание крыс в салфетку, сетку из мягкой проволоки или специальные жилеты, разнообразной конструкции фиксаторы и камеры (Там же, стр.258-259).

Индивидуальную манипуляционную камеру для быстрой фиксации и проведения инъекций разработал Б.Т.Швиняко (1972 г.), а С.Д.Ковтун и Н.В.Кокшарева (1970 г.) предложили специальные жилеты, изготовляемые из автокамерной резины (Там же, стр.259). Для проведения внутрибрюшинных и подкожных инъекций Н.И.Ложкин (1971 г.) разработал металлический фиксатор (Там же, стр.261).

Предложенные способы и устройства для фиксации мелких лабораторных животных обладают рядом существенных недостатков: не обеспечивают полной и надежной фиксации мелких лабораторных животных, не позволяют обеспечить всесторонний доступ к телу животного, особенно при проведении манипуляций и оперативных вмешательств в области передней поверхности шеи, грудной клетки и брюшной полости. Кроме этого, если и удается добиться полной временной обездвиженности лабораторного животного, то это достигается только нажиманием, сдавливанием и прижиманием отдельных частей его тела, что не может являться положительным моментом при проведении экспериментов. В крайнем случае приходится прибегать к помощи ассистента.

При проведении же продолжительных операций под наркозом возникает также необходимость в длительной фиксации наркотизированных животных к операционному столу в положении на спине, что при одних известных способах вообще невозможно, а в других неприемлемо и неудобно, или же не обеспечивают должного доступа к необходимым частям тела лабораторного животного.

Прототипом способа фиксации является способ длительного обездвиживания наркотизированных крыс к операционному столу путем привязывания (И.П.Западнюк, В.И.Западнюк и др. Лабораторные животные. «Вища школа», 1983, стр.262).

Несмотря на простоту выполнения, данный способ также обладает рядом существенных недостатков: как бы и чем бы ни было осуществлено привязывание, всегда существует определенный риск выдергивания и освобождения конечности оперируемого животного. Если же добиваться гарантированной и плотной фиксации, то приходится привязывать достаточно туго, с самозатягивающейся петлей, с вытягиванием конечностей, и по сути дела, «распятием» тела животного. Это неизбежно вызывает расстройство периферического кровообращения в привязанных конечностях, сопровождающееся видимыми изменениями цвета кожных покровов в виде цианоза, отеком, а также дополнительными болевыми ощущениями для лабораторного животного.

На различных стадиях наркоза лабораторные животные могут совершать непроизвольные, не скоординированные движения конечностями, головой и туловищем, особенно при проведении болезненных для них манипуляций. Недостатком данного способа фиксации является также невозможность фиксирования туловища, особенно в области брюшной полости и грудной клетки, из-за их естественной ритмичной дыхательной экскурсии.

Задача изобретения состоит в том, чтобы обеспечить надежную, простую, быструю фиксацию наркотизированных мелких лабораторных животных на операционном столе в положении на спине без отрицательных воздействий на кровообращение их конечностей с одновременным обеспечением удобного всестороннего доступа исследователю для проведения различных оперативных манипуляций на теле животного с возможностью постоянного визуального контроля состояния кожного кровообращения в местах фиксации в случае применения прозрачного фиксатора.

Технический результат, обеспечиваемый изобретением, заключается в следующем: упрощение способа фиксации за счет использования при его осуществлении несложных и быстрых манипуляций, применение широко распространенных и доступных материалов в качестве фиксаторов, повышение надежности фиксирования, значительное снижение неблагоприятных воздействий на фиксируемые конечности лабораторных животных, повышение удобства работы оперирующего экспериментатора.

На Фиг.1 изображено устройство для фиксации мелких лабораторных животных на операционном столе, на Фиг.2 изображен вид в разрезе конечности, зафиксированной к направляющей пластины при помощи липкой ленты.

Суть изобретения состоит в размещении наркотизированного лабораторного животного, например крысы, на устройстве, состоящем из толстой, легкообрабатываемой для изготовления пластины 1, например из пластика или фанеры с подставочными, нескользящими по поверхности стола упорами 2, например из резины, имеющей выпиленные направляющие 3, повторяющие контуры размещенного на спине животного с раскинутыми в стороны передними и задними лапами, его головы, и в фиксации конечностей 4, грудной клетки, головы путем обертывания широкой липкой лентой — фиксатором 5, например лейкопластырем или скотчем вокруг направляющих пластины. Размеры, толщина пластины, длина и ширина выпиливаемых направляющих, а также углы между ними подбираются опытным путем в зависимости от средних размеров применяемых групп лабораторных животных. Лейкопластырь или скотч прочно приклеивается к коже и к многочисленным волоскам шерсти по всей площади соприкосновения и обеспечивает надежную фиксацию конечностей и частей туловища к нижележащему устройству. При этом совсем не обязательно туго заворачивать фиксатор или вытягивать конечности, что избавляет от необходимости частичного сдавливания или прижатия частей туловища лабораторного животного к нижележащей поверхности. Объем движений в зафиксированных конечностях сохраняется в пределах смещения кожи лабораторного животного, что в предполагаемых условиях экспериментов является величиной незначительной.

Применение способа позволяет в течение длительного времени обеспечить надежную фиксацию конечностей и туловища размещенного в положении на спине наркотизированного мелкого лабораторного животного без отрицательного воздействия на региональное кровообращение его конечностей, с возможностью удобного и всестороннего доступа оператора ко всем частям тела животного. В случае применения прозрачной липкой ленты — скотча обеспечивается также визуальный контроль состояния кожного кровообращения в местах фиксации.

Пример. Белая беспородная крыса №159/682 весом 235 г, самец, наркотизирован диэтиловым эфирным наркозом в эксикаторе. После наступления состояния глубокого наркоза крыса вынута из эксикатора и расположена на устройстве для фиксации мелких лабораторных животных в положении на спине. Передние и задние лапы зафиксированы заранее приготовленными кусочками широкого медицинского лейкопластыря к соответствующим направляющим устройства путем обертывания. Голова зафиксирована путем наложения лейкопластыря на область нижней челюсти и совместного обертывания с соответствующей направляющей устройства. Для уверенной фиксации головы можно дополнительно узкие кусочки лейкопластыря заклеить за верхние резцы крысы изнутри и с небольшой подтяжкой приклеить к передней части направляющей для головы.

Разрезом кожи в области шеи и путем тупого расслаивания нижележащих тканей обнажена левая сонная артерия и левая яремная вена, куда вставлены и зафиксированы лигатурами поливиниловые канюли, периферические концы которых соединены через иглы к устройству для моделирования клинической смерти путем кровопускания и последующего нагнетания аутокрови. После окончания обескровливания и с наступлением клинической смерти приступили к реанимационным мероприятиям. Для проведения искусственного дыхания использована малогабаритная система искусственной вентиляции легких для мелких лабораторных животных. Стимуляция сердца проводилась непрямым массажем сердца. Период умирания составил 9 мин 30 сек, объем кровопотери — 6,8 мл, время появления сердечной деятельности — 54 сек, появление первого самостоятельного вдоха — 5 мин 40 сек. После установления самостоятельной сердечной деятельности и самостоятельного дыхания канюли удалены с наложением лигатур на кровеносные сосуды, операционная рана послойно зашита с обработкой раны. Подопытное животное освобождено от фиксирующих пластырей, снято с устройства для фиксации, укутано и уложено под настольную лампу для последующего ухода и наблюдения. Крыса была успешно реанимирована. Отдаленные результаты удовлетворительные.

За все время эксперимента описанный способ фиксации обеспечил надежную и прочную обездвиженность наркотизированного животного к устройству для фиксации мелких лабораторных животных на операционном столе в положении на спине без каких-либо отрицательных последствий для оперированного животного.

Способ фиксации мелких лабораторных животных на операционном столе в положении на спине путем фиксирования конечностей, туловища и головы, отличающийся тем, что животное размещают на устройстве, содержащем основание с подставочными упорами и направляющими, повторяющими контуры размещенного на спине животного с раскинутыми в стороны передними и задними лапами, его головы, после чего фиксируют конечности, туловище, голову липкой лентой к направляющим путем обертывания.

Источник