Способы диагностики половых инфекций

Методы диагностики ЗППП

Методы диагностики инфекционных заболеваний делятся на две категории: выявление непосредственно самих возбудителей инфекций (бактерии и вирусы) и выявление антител к ним. К первому типу относятся микробиологические исследования и молекулярная диагностика, ко второму — серологические и иммунохимические исследования.

Микробиологические исследования

Бактериоскопический метод (мазок на инфекции)

Мазок (бактериоскопический метод) — самый распространенный метод лабораторной диагностики.

При бактериоскопическом методе анализ выполняется с помощью светового микроскопа. Исследуемый материал вносят в каплю физраствора, тщательно размешивают и распределяют по стеклу. Должно наступить хорошее окрашивание частей клеток и бактерий в разные цвета, чтобы оценить состав выделений из уретры, влагалища и шейки матки.

Анализ соскоба из уретры или влагалища в гинекологии позволяет определить: — количество лейкоцитов (их повышение говорит об инфекции, но у здоровых женщин небольшое число лейкоцитов присутствует во флоре); — количество эритроцитов (основной показатель воспалительного процесса при повышенном количестве); -состав флоры (у женщин он зависит от менструального цикла, но активность клеток говорит о нарушении микрофлоры); — наличие трихомонады, гонококков, грибка – основная цель для выявления возбудителя инфекций; — наличие лактобацилл (их отсутствие говорит о нарушенной микрофлоре). Также мазок определяет степень чистоты влагалища женщины: 1 и 2 степень – характерна для здоровой флоры, а 3 и 4 – выявляет кольпит, воспаление.

Преимущества данного метода состоят в простоте, доступности и быстроте получения результатов (30 — 60 мин и менее). Однако чувствительность данного метода ограничена (около 105 бактерий в 1 мл). Практически не определяются в урогенитальном мазке вирусы, хламидии, микоплазмы и уреаплазмы, и одних только результатов мазка часто бывает недостаточно для постановки диагноза. Для диагностики этих инфекций рекомендуется использовать методы ПЦР-диагностики и ИФА-исследований. Результаты мазка обычно можно использовать как ориентировочные.

Перед сдачей мазка лучше воздержаться от мочеиспускания.

Бактериологический метод (бакпосев)

Бакпосев – метод диагностики ЗППП путем выращивания микробов в благоприятной для этого среде. Он является золотым стандартом в определении инфекций, поскольку выявляет не только вирус, но и его активность. Преимуществом данного метода является возможность не только выявить бактерию, но и возможность получить антибиотикограмму, на основе которой врач назначает точное лечение. Наиболее часто бакпосев используют для диагностики уреаплазмоза, микопламзоза, трихомониаза, хламидиоза, различных форм кандидоза.

Правила сдачи анализа на бакпосев:

• за сутки не спринцеваться, не пользоваться вагинальными свечами;
• за сутки до анализа воздержаться от половых контактов;
• за неделю прекратить прием антибиотиков;
• не опорожнять мочевой пузырь за 1,5-2 часа.

Молекулярная диагностика

ПЦР-диагностика, или полимеразная цепная реакция, направлена на определение специфической нуклеотидной последовательности участка ДНК возбудителя инфекции внутри клетки, чего нельзя добиться при мазке или бакпосеве. ПЦР-анализ часто используется для выявления: хламидиоза, уреаплазмоза, микоплазмоза, гениального герпеса, гонореи, трихомониаза. ДНК-диагностика незаменима для выявления вирусных гепатитов и ВИЧ-инфекции. Данный метод способен выявить возбудителя даже на стадии инкубационного периода, однако он не дает представления об активности вируса, как это дает ИФА. Кроме того, ПЦР может не выявить генитальный герпес и цитомегаловирус в соскобе с влагалища, если вирус находится в «спячке» — для выявления данных инфекций рекомендуется использовать метод иммуноферментного анализа. Правила сдачи материала на ПЦР-диагностику такие же, как при бакпосеве.

ПЦР — наиболее точный и современный метод диагностики. Проведенная в нескольких зарубежных исследо­вательских центрах суммированная оценка чувствительности различных методов диагностики показала, что «быстрые» или экспресс-тесты имеют чувствитель­ность 40-60%, ИФА — 50-70%, прямая иммунофлюоресценция (ПИФ) — 55-75%, культуральное исследова­ние — 60-80%, а ПЦР от 90 до 100%.

Серологические и иммунохимические исследования

ПИФ предусматривает прямое выявление антигенов хламидий.

ПИФ-метод является важнейшим скриниговым методом диагностики урогенитального хламидиоза.

Показания к назначению анализа:

• Острая фаза заболевания.
• Хроническая фаза заболевания.
• Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта.
• Беременность при отягощённом акушерском анамнезе.
• Бесплодие неясного генеза.

Подготовка к исследованию: У женщин взятие биологического материала лучше всего проводить не ранее чем через 14 дней после менструации. Перед взятием материала пациентам рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов.

Материал для исследования: соскоб из уретры или цервикального канала, осадок мочи, секрет предстательной железы.

Недостатком данного метода является частота ложноположительных результатов на хламидиоз. При использовании метода прямой иммунофлюоресценции ложноположительный диагноз урогенитального хламидиоза ставится у 36% пациентов. В зарубежной практике установленный по ПИФ диагноз принято подтверждать с помощью культурального исследования.

Иммуноферментный анализ нацелен на выявление антител в крови. Соответственно, чем больше титр, тем больше антител к тому или иному инфекционному заболеванию. IgG – антитела говорят о перенесенном в прошлом инфекционном заболевании, а IgМ – антитела говорят о наличии острого инфекционного процесса. ИФА позволяет диагностировать:

• вирусные инфекций: гепатиты, ВИЧ-инфекции, вирус герпеса, краснухи, цитомегаловирус;
• бактериальные инфекции: туберкулез, боррелиоз, сифилис;
• иные болезни: лямблиоз и токсоплазмоз.

Такой анализ крови необходим, чтобы определить стадию заболевания, оценить эффективность лечения, получить информацию о перенесенном ранее заболевании.

Источник

Линейка анализов на половые инфекции: что сдавать

Заболевания, передающиеся половым путем, опасны не только для репродуктивного здоровья, но и для организма в целом. Часто они протекают бессимптомно, поэтому важно регулярно посещать врача. В клинике Dr. AkNer вы можете пройти анализы на половые инфекции индивидуально или в рамках комплексной диагностики.

Какие патологии определяют лабораторные исследования

Заболевания половой сферы могут вызывать самые разные микроорганизмы. Заразиться ими достаточно просто: причиной способен стать незащищенный половой контакт любого типа. Некоторые инфекции передаются бытовым путем при несоблюдении личной гигиены. У людей с высокой сексуальной активностью и большим количеством партнеров риск заболеть гораздо выше.

По типу возбудителя заболевания разделяют на следующие группы.

Вирусные инфекции. К этой группе относится известный вирус папилломы человека (в зависимости от штамма заболевание может быть как безопасным, так и вызывать онкологические перерождения, поэтому важно проводить анализы на скрытые половые инфекции). Кроме ВПЧ, в группу входят гепатиты В и С, ВИЧ, вирус Эпштейна-Барра, цитомегаловирус, вирус простого герпеса.

Бактериальные инфекции. К ним относятся хламидиоз, микоплазмоз, уреаплазмоз, гонорея, сифилис, трихомониаз, гарднереллез.

Грибковая инфекция, например, кандидоз.

Паразитарная инфекция. Возбудителем являются насекомые или клещи. К данной группе заболеваний относят лобковый педикулез и чесотку.

Методы исследования

Анализы на половые инфекции проводят стандартными лабораторными методами.

Бактериологический посев. Исследование предполагает помещение биоматериала в культуральную среду. В лаборатории поддерживаются температурный режим и влажность, благоприятствующие росту бактерий или грибов. Через несколько дней колония вырастает. Врач-лаборант может под микроскопом определить возбудителя, чтобы подобрать лучший препарат для лечения. Посев – метод высокой достоверности, однако его результаты придется ждать от 2 дней до нескольких недель.

Серологические исследования. Наиболее популярный – иммуноферментный анализ (ИФА). В качестве материала выступает кровь, в ней определяют наличие специфических белков и иммуноглобулинов, которые организм вырабатывает, чтобы бороться с инфекцией. Метод показывает не только их наличие, но и количественные показатели. Благодаря этому можно установить стадию заболевания: острую или хроническую.

ПЦР или полимеразная цепная реакция. Метод основан на идентификации ДНК инфекционного агента. ПЦР позволяет с высокой точностью определить возбудителя, даже если он присутствует в крови в очень малых количествах. ПЦР используют для идентификации вирусных и бактериальных инфекций.

Сбор биоматериала

Многих интересует, какие анализы сдают на половые инфекции. Среди наиболее распространенных — забор крови, мочи и мазок. Врач решает, какой анализ назначить, в каждом случае индивидуально. Это зависит от наблюдаемой симптоматики, цели исследований и предыдущего анамнеза пациента.

Мазок биоматериала. Берется врачом с помощью специального инструмента. Для женщин материал собирается со стенок влагалища, цервикального канала или уретры. У мужчин мазок берут из уретрального канала. Наиболее часто используется для бактериологического посева.

Венозная кровь. Является основным материалом для проведения анализов ПЦР и ИФА.

Моча служит материалом для анализа методом ПЦР (жидкость рекомендуется сдавать непосредственно в лаборатории в стерильную специальную емкость).

Перед обследованием

Подготовка к анализам на половые инфекции зависит от типа исследования и материала. Если у пациента берут кровь, то в течение трех-четырех дней до процедуры нельзя употреблять спиртные напитки, есть тяжелую пищу, испытывать физические и психологические нагрузки. Забор материала выполняется с утра, натощак, важно, чтобы последний прием пищи состоялся за 8-12 часов.

При сборе мочи на анализ отдается средняя утренняя порция. Пациенту необходимо вечером провести гигиену половых органов. Собирать жидкость нужно в чистую емкость, чтобы предупредить появление посторонних примесей.

Если врач назначил мазок или соскоб, рекомендуют воздержаться от сексуальных отношений как минимум на протяжении трех дней до сдачи анализа. Для женщин за 3-4 дня до процедуры необходимо отказаться от средств интимной гигиены, не использовать свечи, гели, мази, тампоны. Если мазок сдается из мочеиспускательного канала, нельзя мочиться за 3 часа до проведения исследования. Анализы на половые инфекции у мужчин также требуют от пациента сексуального покоя. Врачи рекомендуют воздержаться от семяизвержения на протяжении 3-4 дней до сдачи анализа.

В клинике Dr. AkNer вы можете пройти комплексное обследование, сдать анализы и получить консультацию компетентных врачей. Медицинский центр занимается лечением как половых инфекций, так и другими патологиями мочеполовой системы.

Источник

Современные методы диагностики инфекций, передающихся половым путём

Термин «инфекции, передающиеся половым путем» (ИППП, или STD — Sexual Transmitted Diseases) был предложен Всемирной организацией здравоохранения в 1982 г.

ИППП относятся к числу наиболее социально значимых заболеваний. Объясняется это не только широким распространением, но и тяжелыми последствиями как для организма больного, так и для общества в целом.

Осложнения приводят к нарушению репродуктивного здоровья женщин и мужчин, тяжелым врожденным заболеваниям у детей, поражениям внутренних органов больного. К группе таких заболеваний сегодня относят клинически неоднородные болезни, объединенные по эпидемиологическим критериям, для которых характерен преимущественно половой путь передачи инфекции при прямом контакте.

В комплексе клинико-лабораторных мероприятий, направленных на санацию организма человека, диагностика инфекций, передаваемых половым путем, занимает ведущее место.

Это связано с несколькими обстоятельствами:

• высокий уровень заболеваемости: по данным официальной статистики ежегодно ИППП в мире страдает более 500 млн. человек и достигает в России пандемической ситуации (трихомоноз, сифилис, гонорея);

• значительным (до 40%) количеством сочетанных (микст-инфекций) заболеваний урогенитального тракта;

• влиянием на репродуктивное здоровье;

• увеличением атипичных «стертых» случаев течения инфекционного процесса, как правило, без манифестных клинических проявлений.

Сегодня к группе ИППП причисляют более 20 нозологических форм, среди которых классические венерические заболевания: сифилис, гонорея, шанкроид, венерическая лимфогранулема, паховая гранулема; ряд вирусных инфекций: ВИЧ-инфекции, генитальный герпес, цитомегаловирусная инфекция, папилломавирусная инфекция (кондиломатоз), большая группа урогенитальных инфекций: хламидиоз, трихомониаз, микоплазмоз, граднереллез; тропические трепонематозы (фрамбезия, пинта, беджель); паразитозы: чесотка, лобковый педикулез; другие заболевания, такие как амебиаз, шигеллез, лямблиоз и пр.

Особенностями течения современных ИППП являются стертая клиническая картина и длительное рецидивирующее течение, появление новых штаммов возбудителей заболеваний, устойчивых к традиционным лекарственным препаратам. В связи с чем актуальность именно лабораторной диагностики ИППП неоспорима.

Лабораторную диагностику следует рассматривать как комплекс исследований, направленных на:
• установление инфекционного агента заболевания;
• оценку его патогенности и вирулентности;
• определение его чувствительности к наиболее широко используемым в клинике лекарственным препаратам;
• установление характера взаимодействия с другими микробами и клетками хозяина;
• изучение динамики патологического процесса и эффективности терапевтических воздействий;
• установление критериев излеченности.

В последние годы лабораторная диагностика ИППП и, в частности, бактериальных инфекций (сифилиса, гонореи, хламидиоза), а также вирусных заболеваний, вышла на качественно более высокий уровень, что связано с усовершенствованием диагностических технологий: разработкой молекулярно-биологических методов, иммуноферментного анализа, созданием автоматизированных систем верификации микроорганизмов, индикации их минимального количества в патологическом материале. Определенный прогресс достигнут в бактериологической диагностике: созданы адекватные питательные среды, совершенствуется техника культивирования микроорганизмов.

Лабораторная диагностика

Методология детекции и идентификации патогенных возбудителей при ИППП может быть условно подразделена на:

• Микроскопические ( бактериоскопические)
• Серологические (ИФА, РПГА, РСК)
• Культуральные ( бактериологические и культуру клеток)
• Молекулярно-биологические (ПЦР)
• Скрининговые – ферментспецифические и иммунохроматографические методы исследования.

• Микроскопическая диагностика основана на исследовании нативных или окрашенных препаратов (мазков) в светооптическом микроскопе, а также микроскопировании с конденсором «темного поля» и фазово-контрастной микроскопии. К микроскопическим методам относится также люминесцентный метод исследования: прямая и непрямая иммунофлюоресценция (ПИФ и НПИФ). Последние методы могут быть отнесены и к серологической (иммунологической) диагностике, визуализация результатов которых осуществляется на микроскопическом уровне.

• Серологические исследования основаны на определении специфических антител в сыворотке крови, а также секретах. Наиболее часто для серодиагностики используют иммуноферментный анализ (ИФА на наличие антител). По сравнению с другими серологическими реакциями ИФА обладает рядом достоинств: возможность автоматического учета результатов, выявление антител классов IgG, IgA, IgM, а также суммарных антител. Вместе с тем, следует учитывать низкую иммуногенность «урогенитальных штаммов» (в отличие от Т.pallidum), возможность присутствия антител после ранее перенесенной инфекции, а также индивидуальные особенности иммунной системы пациента способной «выдавать» антительный ответ без клинических проявлений и наличия воспалительного процесса. Необходимо получение «диагностического титра», коррелирующего с основным заболеванием. Это особенно важно при хламидийной и вирусной инфекциях, когда антительный ответ в ИФА и других серореакциях часто присутствует без какой-либо связи с воспалительным процессом, т.е. у практически здоровых людей. Строго говоря, серологические методы не являются регламентированными в диагностике бактериальных ИППП, хотя в случае хламидиоза они могут быть полезными при детекции системного хламидиоза-венерической лимфогранулемы.

• Культуральные (бактериологические) методы диагностики бактериальных инфекций, как и микроскопические, являются «золотым стандартом», во многих случаях подтверждающими, весьма достоверными и входят во многие комплексные исследовательские методологии. Без них трудно представить себе детекцию и идентификацию гонореи, трихомоноза, хламидиоза, микоплазмоза и других ИППП. Особенно возросла роль микробиологических исследований в связи с пересмотром в последние годы представлений о вагинальных инфекциях как патологическом процессе, вызванным одним микроорганизмом — моноинфекции. Классический постулат — «один микроб — одно заболевание»- как правило не находит подтверждения в клинике, и диагностика, основанная лишь на выявлении одного возбудителя воспалительного процесса, бесперспективна.
Бактериологические методы унифицированы и регламентированы Приказами МЗ СССР (№936, №1570 и др.). Чувствительность и специфичность бактериологической диагностики весьма высока, другим существенным преимуществом этой методологии является возможность обнаружения «живой» (жизнеспособной) бактериальной клетки, простейших, установления их чувствительности к лекарственным препаратам. Недостатком метода является его длительность. Следует учитывать, что некоторые микроорганизмы являются трудно культивируемыми. Однако, несмотря на появление новых диагностических тестов: ИФА, ПЦР, во многих случаях лишь бактериологическая диагностика обеспечивает адекватный этиологический диагноз.

• Молекулярно-биологические методы диагностики разнообразны и основаны на принципе комплементарности — способности цепей ДНК распознавать друг друга с высокой степенью специфичности, что позволяет с достаточной точностью идентифицировать последовательность нуклеотидов в генах искомого микроорганизма. Из многочисленных модификаций этого метода наиболее распространена полимеразная цепная реакция (ПЦР), впервые описанная в 1985 году американским исследователем Kary Mullis. Достоинствами ПЦР, кроме высокой чувствительности и специфичности, является возможность определения широкого спектра возбудителей в одном клиническом образце, т.е. получение «микробиологического паспорта» о наличии всех возбудителей в исследуемой клинической пробе, а также достижение результата в течение нескольких часов, что значительно быстрее, чем провидение культуральных исследований.

В то же время следует иметь в виду, что само по себе использование ПЦР не является гарантией от получения ошибочных результатов, так как качество отечественных диагностикумов оставляет желать лучшего, необходимо соблюдать строгие правила проведения исследования, проводить регулярный контроль праймеров для ПЦР-анализа.
Таким образом, современными следует считать методы, позволяющие наиболее достоверно оценивать состояние микроорганизма на тех или иных стадиях, формах заболевания вне зависимости от времени их создания. Необходимо отметить, что, несмотря на значительный прогресс в автоматизации диагностических процедур, значительное количество исследований невозможно «поручить» роботам и приборам и в их проведении присутствует «человеческий фактор». Это, в свою очередь, является дополнительной причиной ошибок в лабораторной диагностике ИППП.

Наряду с квалифицированным использованием современных лабораторных методологий, оборудования, инструментария, важнейшей составной частью комплексного обследования пациентов является правильный забор клинического материала (кровь, моча, выделения, соскобы и др.), его хранение и транспортировка. При этом следует учитывать способ диагностики, локализацию инфекционного агента или их сочетаний, а так же сроки доставки клинического материала в лабораторию, безопасность для пациента и клинициста. В практике современных лабораторий используют специальные контейнеры с консервантами и транспортные среды.

Существуют достаточно известные правила взятия и транспортировки биологического материала подлежащего лабораторному исследованию.

Для микроскопических (цитологических) исследований материал представляет собой соскоб из цервикального канала и влагалищной части шейки матки, аспират или соскоб из заднего нижнего свода влагалища и др. В течение 24 часов перед исследованием не следует проводить спринцевание, а также исключить интравагинальную терапию. Запрещается исследовать материал во время менструального цикла. Исследуемый материал, нанесенный на чистое, обезжиренное спиртом стекло, должен быть высушен на воздухе. Стекла должны быть промаркированы с учетом локализаций и сопровождены соответствующей документацией.

При исследовании урогенитального хламидиоза за 10 дней до взятия материала необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры, а также учесть, что присутствие в исследуемых пробах большого количества слизи и примеси крови может привести к ложноположительным или ложноотрицательным результатам.

Перед взятием материала из уретры пациент должен в течение 1,5-2 часов воздержаться от мочеиспускания, а непосредственно перед взятием материала наружное отверстие уретры следует обработать тампоном со стерильным физиологическим раствором.

Мочу собирают утром натощак, не ранее чем через 2-3 часа после последнего мочеиспускания. Собранная моча при длительном хранении (более 3 часов) при комнатной температуре непригодна для исследования.
Для исследования на гонорею, также как и при других ИППП, за 10 дней до исследования прекращают прием антибиотиков и местных процедур, а так же у женщин материал рекомендуется брать перед менструацией или через 1-2 дня после ее окончания. Воздержаться от мочеиспускания в течение 3-4 часов и половых сношений, а также туалета наружных половых органов и спринцевания. Исследуемый материал не должен содержать примеси крови.

Для бактериологического исследования на трихомоноз, хламидиоз рекомендуется прекращение приема антибиотиков за месяц до исследования. У женщин взятие проб целесообразно проводить не ранее, чем через 14 дней после менструации, а непосредственно перед забором воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов. При отсутствии выделений необходимо провести массаж уретры с помощью зонда для взятия материала.
Для проведения ИФА используют сыворотку венозной крови, взятой натощак путем пунктирования вены.
Взятие, хранение и транспортировка биологических проб с целью лабораторного исследования должны осуществляться в соответствии с нормами и предписаниями Санэпиднадзора, Приказов Минздрава, а также ГОСТов.
Следует иметь в виду, что неукоснительное соблюдение всех этих правил служит определенной гарантией получения достоверных результатов исследований, а также безопасности клиницистов и лабораторных работников, осуществляющих контакт с биологическими, потенциально инфицированными жидкостями.

На основании выше изложенного можно заключить, что расширенный алгоритм обследования пациентов должен включать проведение следующих исследований:

• при гонорее: микроскопирование окрашенных мазков и культуральную диагностику с идентификацией нейссерий; ПЦР-анализ может быть использован при отсутствии возможности проведения бактериологического исследования или как дополнительный вспомогательный метод;
• при трихомонозе: микроскопия нативных, в том числе и в темном поле, а также окрашенных мазков и культуральное исследование, ПЦР-вспомогательный метод;
• при хламидиозе: ПИФ (НПИФ), культура клеток или ПЦР анализ; серологические исследования, ИФА должны использоваться при острых формах заболевания, с учетом диагностических титров и корреляции с проявлениями воспалительного процесса;
• при мико- и уреаплазмозе: культуральная диагностика или ПЦР, в качестве скрининга- иммунофлюоресцентный метод;
• бактериальный вагиноз (гарднереллез): выявление «ключевых» клеток в окрашенных мазках, бактериологический метод или ПЦР для детекции G.vaginalis, обнаружение которой не является единственно достаточным для установления диагноза.

Исполнитель:
Главный внештатный специалист по лабораторной диагностике Зав. КДЛ НУЗ «ДКБ на ст.Воронеж ОАО «РЖД» Сильчева С.К.

Заведующая клинико-диагностической лабораторией
НУЗ «Дорожная клиническая больница на ст.Воронеж-1 ОАО «РЖД»
Сильчева Светлана Константиновна

Источник