Способ получения бруцеллезной живой вакцины

Вакцина бруцеллёзная живая сухая

АО «НПО «Микроген», Россия

Рег.№ Р N003612/01 Бессрочно

• Форма выпуска: 1 ампула / 4-10 доз №5 в комплекте с растворителем.
• Схема вакцинации: однократно накожно или внутрикожно, ревакцинация через 12 месяцев.

Инструкция по применению

Описание препарата ВАКЦИНА БРУЦЕЛЛЕЗНАЯ ЖИВАЯ СУХАЯ (BRUCELLA VACCINE LIVE DRY) создано в 2014 году на основании инструкции, размещенной на официальном сайте Минздрава РФ

Владелец регистрационного удостоверения:

АО «НПО «Микроген», Россия

Код ATX: J07AD01 (Brucella antigen)

Лекарственная форма

Вакцина бруцеллёзная живая сухая

лиофилизат д/пригот. сусп. д/п/к введ. и накожного скарификационного нанесения: 4-10 доз амп. 5 шт.

Форма выпуска, состав и упаковка

Лиофилизат для приготовления суспензии для п/к введения и накожного скарификационного нанесения в виде пористой массы белого или белого с желтоватым оттенком цвета.

лиофилизированная культура живых микробов вакцинного штамма Brucella abortus 19 BA

3.4×108 — 4.6×108 в 0.5 мл растворителя

для накожного скарификационного нанесения

4×109 — 1.6×1010 в 0.1 мл растворителя

Вспомогательные вещества: сахароза 0.015 г, натрия глутамат моногидрат 0.00225 г, тиомочевина 0.00075 г, желатин 0.00225 г.
4-10 накожных доз — ампулы (5) — пачки картонные.

Клинико-фармакологическая группа: Вакцина для профилактики бруцеллеза

Фармако-терапевтическая группа: МИБП-вакцина

Фармакологическое действие

Вакцина через 20-30 дней после прививки обеспечивает развитие иммунитета продолжительностью 10-12 месяцев, максимальная напряженность иммунитета сохраняется 5-6 месяцев.

Показания

Профилактика бруцеллеза козье-овечьего типа у взрослых.
Прививкам подлежат лица, выполняющие следующие работы:

• по заготовке, хранению, обработке сырья и продуктов животноводства, полученных из хозяйств, где регистрируются заболевания скота бруцеллезом;
• по убою скота, больного бруцеллезом, по заготовке и переработке полученных от него мяса и мясопродуктов.

Животноводы, ветеринарные работники, зоотехники в хозяйствах энзоотичных по бруцеллезу.

Лица, работающие с живыми культурами возбудителя бруцеллеза.

Режим дозирования

Вакцинацию проводят однократно накожно или подкожно. Одна доза при накожном введении составляет 2 капли (0,1 мл) и содержит 1х1010 м.к., при подкожном введении составляет 0,5 мл и содержит 4×108 м.к. Ревакцинацию проводят по показаниям через 10-12 мес накожно, используя половинную дозу, которая составляет 1 каплю (0,05 мл) и содержит 5 х 109 м.к.

С целью выявления противопоказаний врач (фельдшер) в день прививки проводит опрос и осмотр прививаемого с обязательной термометрией. При температуре выше 37 °С прививка откладывается. В случае необходимости проводят необходимое лабораторное обследование.

Перед каждой прививкой у вакцинируемого в обязательном порядке определяют наличие специфического иммунитета с помощью одной из серологических или кожно-аллергических реакций. Прививкам подлежат лица с отрицательной реакцией.
Прививки следует проводить не позднее, чем за 3-4 недели до начала работы, связанной с риском заражения.

Проведенную прививку регистрируют в установленных учетных формах с указанием наименования препарата, даты прививки, дозы, названия предприятия-изготовителя препарата, номера серии, реакции на прививку.

Вакцинация накожным способом.

Препарат растворяют натрия хлорида раствором для инъекций 0,9 %, который вносят в ампулу стерильным шприцем с иглой из расчета 0,1 мл на одну прививочную дозу. Ампулу встряхивают до образования равномерной суспензии. Время растворения вакцины не должно превышать 1 мин. Растворимый препарат не должен содержать осадков или хлопьев.

Место прививки — наружную поверхность средней трети плеча — обрабатывают спиртом или смесью спирта с эфиром; применение других дезинфицирующих средств не допускается.

После испарения спирта и эфира, не прикасаясь к коже, наносят две капли вакцины на расстоянии 30-40 мм друг от друга, кожу натягивают и стерильным скарификатором проводят через каждую нанесенную каплю вакцины 6 насечек (3 продольные и 3 поперечные) длиной 10 мм каждая с расстоянием между насечками 3 мм. Насечки не должны кровоточить, кровь должна выступать только росинками.

Плоской стороной скарификатора втирают вакцину в насечки в течение 30 сек и дают подсохнуть 5 мин.

При ревакцинации применяют половинную дозу, т.е. 1 каплю вакцины, через которую делают 6 насечек.

Вакцинация подкожным способом

Прививочная доза препарата при этом способе в 25 раз меньше, чем при накожной вакцинации; разведение вакцины производят из расчета 12,5 мл натрия хлорида раствора для инъекций 0,9 % на одну дозу вакцины для накожного скарификационного нанесения (подкожная доза — 0,5 мл х 25 = 12,5 мл).

Препарат растворяют так же, как для накожной вакцинации, после чего полученную суспензию переносят в стерильный флакон для инъектора, в который вносят необходимый объем растворителя (например, если в ампуле содержится 7 накожных доз вакцины, то содержимое должно быть суспендированным в 12,5 мл х 7, т.е. в 87,5 мл).

Вакцину вводят инъектором, рассчитанном на подкожное введение (БИ-ЗМ или противоинфекционным протектором ППИ-2), согласно Инструкции по применению инъектора в объеме 0,5 мл.

Прививки проводят в область наружной поверхности плеча на границе между верхней и средней третью. Место введения обрабатывают так же, как и при накожной прививке.

Побочное действие

Местная и общая реакция на вакцинацию незначительны. Местная реакция при накожной прививке может появиться через 24-48 ч в виде гиперемии, инфильтрата кожи или в виде розово-красных узелков по ходу насечек, иногда сливающихся в валик или образующихся небольшую припухлость. При безыгольном методе введения через 12-24 ч на месте инъекции могут появиться гиперемия, инфильтрат диаметром до 25 мм, слабая болезненность. Общая реакция возникает в первые сутки у 1-2 % привитых и выражается недомоганием, головной болью, повышением температуры тела до 37,5 — 38°С.

Противопоказания к применению

• перенесенный бруцеллез в анамнезе. Положительная серологическая или кожноаллергическая реакция на бруцеллез;
• острые инфекционные и неинфекционные заболевания, хронические заболевания в стадии обострения — прививки проводят не ранее, чем через 1 мес после выздоровления (ремиссии);
• первичные и вторичные иммунодефициты. При лечении стероидами, антиметаболитами, химио- и рентгенотерапии прививки проводят не ранее, чем через 6 мес после окончания лечения;
• системные заболевания соединительной ткани;
• злокачественные новообразования и злокачественные болезни крови;
• распространенные рецидивирующие заболевания кожи;
• аллергические заболевания (бронхиальная астма, анафилактический шок, отек Квинке в анамнезе);
• беременность и период лактации.

Применение при беременности и кормлении грудью

Применение препарата противопоказано.

Особые указания

Меры предосторожности при применении

Категорически запрещается разведенную для накожного скарификационного применения вакцину вводить подкожно.

Не подлежит применению вакцина, целостность упаковки которой повреждена, с измененными физическими свойствами (посторонние примеси, не растворяющиеся хлопья), с истекшим сроком годности, при нарушении режима хранения.
Вскрытие ампул и процедуру введения препарата осуществляют при строгом соблюдении правил асептики и антисептики. Разведенная вакцина, сохраняемая с соблюдением правил асептики, может быть использована в течение 2 ч.
Учитывая возможность развития анафилактического шока у отдельных высокочувствительных лиц, вакцинированный должен находиться под медицинским наблюдением не менее 30 мин. Места проведения прививок должны быть обеспечены средствами противошоковой терапии.

Сведения о возможном влиянии на способность к вождению автотранспорта и управлению механизмами — Отсутствуют.
Специальные меры предосторожности при уничтожении неиспользованного лекарственного препарата.
Ампулы с неиспользованной вакциной инактивируют кипячением в течение 30 мин, после чего утилизируют в соответствии с СанПиН 2.1.7.728-99 «Правила сбора, хранения и удаления отходов лечебно-профилактических учреждений»

Передозировка

Лекарственное взаимодействие

Прививки против бруцеллеза проводят не ранее, чем через 1 мес после других профилактических прививок или за 1 мес до них.
Допускается одновременная накожная вакцинация живыми вакцинами против бруцеллеза с прививками против одной из следующих инфекций: ку-риккетсиоза, туляремии и чумы.

Условия и сроки хранения

В соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от 2 до 8°С в недоступном для детей месте. Срок годности — 3 года.

Условия отпуска из аптек

Для лечебно-профилактических учреждений.

Ротавирусная инфекция: что важно знать?

Существует несколько типов вируса, но патогенными для человека являются серотипы А, В, С, а наиболее распространен тип А. Этот вирус поражает не только человека, но и разные виды млекопитающих и птиц. Ротавирус группы А считается одной из наиболее частых причин возникновения инфекционных диарей у детей.

Полиомиелит – симптомы, последствия, как не заразиться

Полиомиелит – это острое инфекционное заболевание человека, которое сопровождается поражением нервной системы, развитием парезов и параличей. Полиомиелит в основном поражает детей в возрасте до 5 лет. 1 из 200 инфекций приводит к необратимому параличу. Среди тех парализованных, от 5% до 10% умирают, когда их дыхательные мышцы становятся неподвижными.

Отличие ротавирусной инфекции от кишечной инфекции.

Многие родители паникуют, путая ротавирус, дизентерию и отравление. Врачи предупреждают, что одно из главных отличий – характер стула.

Всё, что вам нужно знать о китайском коронавирусе

Интервью телеканала RT с Дмитрием Львовым — легендой советской вирусологии, экспертом ВОЗ по гриппу и респираторным инфекциям с 1987 года.

Коронавирус: Молот и Танец

Эта статья была результатом невероятных усилий группы обычных людей, работающих круглосуточно, чтобы найти все соответствующие исследования, чтобы структурировать их в единое целое, если это может помочь другим обработать всю имеющуюся информацию о коронавируса.

Источник

Способ получения вакцины против бруцеллеза

Использование: биотехнология, вакцина, профилактика бруцеллеза. Сущность изобретения: вакцину получают путем конъюгации белковых антигенов, выделенных из вакцинного штамма Br.abortus 19 с целлюлозной матрицей в присутствии треххлористого хрома. Изобретение позволяет получить при биологической безопасности производства вакцину против бруцеллеза, создающую длительный протективный иммунитет. 4 табл.

Изобретение относится к ветеринарной и медицинской микробиологии, в частности к способам получения вакцин, применяемых для профилактики бруцеллеза.

Известен способ получения вакцины против бруцеллеза, включающий культивирование штамма Brucella abortus 19 на плотной питательной среде с последующим смывом бактериальной массы, лиофильным высушиванием микробных клеток.

Однако вакцина, полученная известным способом, имеет следующие недостатки: является живой, в результате чего развивается бактерионосительство; экологически небезопасна в связи с возможностью реверсий штамма; абортогенна; вызывает образованные антител в высоких титрах, что создает трудности при диагностике бруцеллеза.

Известен также способ получения вакцины против бруцеллеза, включающий культивирование штамма Brucella abottus 54 с последующей экстракцией антигена бруцелл, очищением на колонках с сефадексом G75, конъюгированием с водорастворимыми производными диальдегиддекстрана, модифицированными грамицидином, с использованием для конъюгации карбодиимида и дополнительной очистки полученного конъюгата. Получают в результате иммуногенную вакцину, защищающую до 89% животных, зараженных вирулентными штаммами бруцелл, и не вызывающую образования антител.

Однако этот способ имеет следующие недостатки: вакцина, полученная известным способом, обладает недостаточно длительными протективными свойствами; используемый штамм Brucella abortus 54 является высоко вирулентным, что создает высокую биологическую опасность при производстве вакцины; способ получения вакцины представляет собой сложный многоэтапный процесс.

Целью изобретения является создание длительного протективного иммунитета, биологической безопасности производства вакцины и упрощение способа.

Это достигается использованием в качестве носителя целлюлозной матрицы и ее конъюгации в присутствии треххлористого хрома с белками антигена, приготовленного из вакцинного штамма бруцелл.

П р и м е р 1. Целлюлозную матрицу готовят по методу Лехтцинд Е.В. и Гурвича А. Е. 1981. Для этого хлопковую вату растворяют в медно-аммиачном комплексе (реактив Швейцера) и добавляют серную кислоту, в результате чего целлюлоза выпадает в виде мелкодисперсной взвеси.

Растворимый бруцеллезный антиген получают по методу Kaneene et al, 1978, для чего смывают с матрасов двухсуточную культуру вакционного штамма Brucella abortus 19, 50 г сырой массы бруцелл ресуспендируют в 200 мл дистиллированной воды, встряхивают в течение 2 ч, смесь автоклавируют 20 мин при 121 о С и после охлаждения центрифугируют при 12 тыс. об/мин в течение 30 мин. Надосадочную жидкость очищают на колонке с сефелексом G25 в физиологическом растворе. Белковый пик, выходящий в объеме колонки, собирают и смешивают с целлюлозной матрицей в соотношении 100 мг белка на 1 г целлюлозы при одновременном добавлении 25 мМ раствора CrCl₃. Оставляют на магнитной мешалке на холоду на 1-3 сут. Отмывают физиологическим раствором. Определяют присоединившийся белок по окрашиванию бромфеноловым синим.

Полученная белково-целлюлозная вакцина (БЦВ) представляет собой мелкодисперсную водную суспензию белого цвета.

П р и м е р 2. Для изучения клеточного иммунитета, индуцированного вакциной, определяют реакцию гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). Мышам BaLb/c подкожно вводят разные дозы вакцины однократно или трехкратно с недельным интервалом. В контроле используют мышей того же привоза, не вакцинированных БЦВ. Через месяц животным вводят в правую лапку разрешающую дозу растворимого антигена (10 мкг белка в 50 мкл физиологического раствора), а в левую лапку 50 мкл физиологического раствора. Уровень ГЗТ оценивают через 24 ч по разнице между толщиной опытной и контрольной лапки. Полученные результаты, представленные в табл. 1, показывают, что БЦВ при всех использованных дозах и режимах ее введения, индуцирует достоверную реакцию ГЗТ.

П р и м е р 3.Для исследования протективных свойств БЦВ в сравнении с исходным растворимым антигеном, а также для изучения неспецифического действия на эти свойства целлюлозной матрицы беспородным белым мышам подкожно вводили разные дозы БЦВ. В контроле мышам вводили исходный растворимый антиген бруцелл в тех же дозах или целлюлозную матрицу без антигена. Через месяц после инъекции мышам внутрибрюшинно вводили 10 3 микробных клеток бруцелл вирулентного штамма 54. Через 1 месяц после заражения проводили бактериологические и серологические исследования. При бактериологических исследованиях делали посев из органов мыши на пробирки со скошенным мясопептонным печеночным глюкозоглицериновым агаром. Через месяц проводили окончательный учет посевов и расчет индекса инфицированности по формуле ИИ где а количество выделенных культур; Ь количество исследованных органов. Кроме индекса инфицированности (ИИ) одновременно определяли количество микробных клеток на селезенку (селезеночное число) с помощью бактериологических посевов 10-крытных разведений гомогената селезенки. Уровень антителообразования в момент забоя животных определяли реакцией непрямой гемагглютинации.

Из данных, приведенных в табл. 2, следует, что БЦВ вызывает снижение индекса инфицированности во всех случаях по сравнению с соответствующей дозой исходного антигена и контролем заражения. Дозы антигена в 25 и 50 мкг белка достоверно (Р 4 м.к. вакцинного штамма 19. Через 1 и 2 месяца после введения вакцин мышей заражали внутрибрюшинно бруцеллами вирулентного штамма 54 в дозе 10 3 м. к. Через месяц после заражения проводили бактериологические исследования. Учет осуществляли также, как в примере 3. Из данных, представленных в табл. 3, следует, что протективный эффект БЦВ через 1 месяц после вакцинации сравним с таковым для живой вакцины, а через 2 месяца после вакцинации высоко достоверно (P 9 м.к. живой вакцины штамма 19. Через 1 месяц после вакцинации животных заражали 10 2 м.к. бруцелл вирулентного штамма 54. Кровь забирали в динамике через 2 недели, 1,2, 3 месяца и исследовали в реакциях агглютинации (РА), связывания комплемента (РСК) и непрямой гемагглютинации (РНГА). Бактериологические исследования проводили, как в примере 3.

Данные табл. 4 показывают, что число зараженных животных, индекс инфицированности и селезеночное число у морских свинок, вакцинированных БЦВ, несколько ниже, чем у вакцинированных живой вакциной.

В опытных группах животных титры антител не превышали 1:25 в РА, 1:10 в РСК и 1:20 в РНГА, тогда как в контрольных группах титры антител составляли в среднем 1:100 в РА, более чем 1:40 в РСК и 1:320 в РНГА. Эти данные показывают, что иммунизация морских свинок БЦВ по сравнению с живой вакциной из штамма 19 вызывает значительно сниженный уровень антителообразования и индуцирует сравнимый протективный эффект.

Таким образом, из примеров 2-5 следует, что БЦВ, приготовленная простым методом соединения белковой части водорастворимого антигена бруцелл вакционного штамма 19 с биологически инертным целлюлозным носителем, индуцирует выраженную реакцию клеточного иммунитета, но слабое антителообразование, и стимулирует развитие протективного иммунитета, напряженность которого возрастает со временем.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА, включающий культивирование бруцелл с последующим выделением антигена и его конъюгацией с носителем, отличающийся тем, что для культивирования используют штамм Brucella abortus 19, антиген получают водной экстракцией, в качестве носителя используют целлюлозную матрицу, а конъюгацию антигена с носителем проводят при их соотношении 1 : 10 (по массе) в присутствии 25 мМ раствора треххлористого хрома.

Источник