Неинвазивный способ определения отцовства при беременности

Все о тесте на отцовство во время беременности

Статья опубликована: 2019-02-20

Рейтинг: 5 из 5

Методики современного ДНК исследования шагнули далеко вперед. Если еще в 20 веке прибегали к опасным технологиям, то сейчас тенденция идет на безопасность, как матери, так и ребенка.

Минусы прошлого и плюсы настоящего.

Совсем до недавнего времени применялся инвазивный метод. Суть которого заключается в прокалывании длинной тонкой игрой брюшной полости беременной женщины. Таким способом забирались образцы хориона или околоплодной жидкости. Из этих образцов получали ДНК плода для анализа. В результате нарушалась целостность плаценты. Главным минусом такой процедуры является вероятность прерывания беременности, возможные нарушения в развитии плода и возникновение замершей беременности. Такие методы уже не используются в современных ДНК лабораториях, на замену им пришли новые технологии.

Сейчас генетика способна получить ДНК не родившегося ребенка из крови мамы. Это кажется невероятным, но такие практики применяются и очень успешно. Анализ называется неинвазивным, что значит “без вторжения”. Он является абсолютно безопасным и не требует каких-либо предварительных консультаций или осмотра врача. Представьте, что Вы идете сдавать кров “на сахар”. Процедура ничем не отличается.

Суть неинвазивного определения отцовства

Опытным путем ученые пришли к выводу, что на 9-10 акушерской неделе беременности в крови матери достигается необходимая для выделения концентрация фетальной ДНК ребенка. Фетальной она называется потому что поступает в организм мамы через плаценту с продуктами жизнедеятельности плода. Иногда применяют термин “циркулирующая ДНК”.

После сдачи 10 мл крови, пробирку с кровью помещают в скоростную центрифугу для отделения плазмы. Плазма легче и поэтому она остается наверху, а кровяные тельца идут в нижнюю фазу. Медицинским шприцем плазму переносят в пробирку с напяленным на ее стенках антикоагулянтом. Так плазма может хранится до одного месяца, даже при температуре 18-21 градус Цельсия. Оставшиеся кровяные тельца утилизируют.

У мамы берется ротовой мазок для выделения ее чистого ДНК. У отца, или отцов также можно провести соскоб буккального эпителия. Но если нужно сделать конфиденциальный тест, без лишнего шума, то прибегают к помощи нестандартных образцов (окурки, ногти, волосы, бритва, зубная щетка, ушная сера, пятна на ткани, столовые приборы и т.д.). Проводить тест на дородовое установление отцовства по нестандартным образцам может только квалифицированная лаборатория с опытным персоналом.

Когда все образцы собраны, они попадают на стол к генетику. Из плазмы выделяется ДНК ребенка и вычитаются маркеры матери (полученные из ее ротового мазка). Далее обрабатывается генетический материал отцов. В итоге получают ДНК профили предполагаемых отцов и ребенка и проводят сравнение. Точность такого метода 99%. Пока не придумано более надежного способа неинвазивного установления отцовства во время беременности. Если маркеры совпали, то мужчина не исключается, как отец. Если не совпали, то исключается.

Альтернативы методу

Самой распространенной альтернативой является биопсия ворсинок хориона или околоплодной жидкости. Об опасности такой процедуры мы уже писали выше. Других вариантов не существует. Конечно можно дождаться рождения ребенка и сделать стандартный ДНК тест. Но, к сожалению, в подавляющем большинстве случаев нет такой возможности. Результат нужен именно сейчас.

Стоимость и сроки

Исследование является высокотехнологичным, т.к. речь идет о незначительных концентрация ДНК. Цена теста ДНК не может быть маленькой и колеблется от 39900 до 60000 рублей. Срок выполнения 10-20 рабочих дней и зависит от количества исследуемых мужчин, срока беременности и видов предоставляемых биологических образцов.

Почему нужно делать тест на отцовство при беременности в нашей ДНК лаборатории?

Генетический центр “ДТЛ” в партнёрстве с ведущей ДНК лабораторией «ИнЛаб Генетикс» уже много лет выполняет ДНК анализ на отцовство при беременности. Обращаясь к нам напрямую, Вам не надо будет переплачивать посредникам и Ваши образцы окажутся в надежных руках. Мы единственные можем использовать нестандартные образцы от отцов. А в подарок Вы получите определение пола ребенка.

Источник

Дородовое определение отцовства

Анализ ДНК точно показывает, является ли определенный мужчина отцом будущего ребенка. Дородовое определение отцовства помогает ответить на этот вопрос уже при беременности.

Инвазивное дородовое определение отцовства

При инвазивном определении отцовства необходимо произвести забор материала от плода. Это можно сделать несколькими способами:

• биопсия ворсин хориона (забор материала проводится на сроке беременности 8–12 недель путем прокола брюшной стенки под контролем УЗИ);
• амниоцентез (под контролем УЗИ выполняют забор околоплодных вод, срок проведения — 16–20 недель);
• кордоцентез (забор пуповинной крови, проводится на сроке 18–24 недели).

Так как инвазивная диагностика всегда сопряжена с определенным риском осложнений, в большинстве клиник она проводится строго по показаниям, к которым определение отцовства не относится. Однако если вы направлены на такую процедуру (например, в связи с повышенным риском хромосомной патологии у плода), заодно можно выполнить на полученном материале и тест на отцовство.

В этом случае вместе с материалом, полученным от плода, нужно предоставить кровь или буккальный соскоб от потенциального отца и кровь матери. Результат будет готов через 7 дней.

Если вы все-таки решили провести инвазивную диагностику именно для определения отцовства, стоит сразу провести и хромосомный микроматричный анализ плода во избежание повторного прохождения процедуры, если впоследствии появится подозрение на наличие у будущего ребенка хромосомной аномалии.

Неинвазивное дородовое определение отцовства

В отличие от инвазивной диагностики, данный тест абсолютно безопасен для плода и не повышает риск осложнений беременности. Исследование можно проводить с 9 недель беременности. Точность теста составляет 99,9 %, срок исполнения – 10 дней.

Для неинвазивного дородового теста с целью определения отцовства из материнской крови выделяют свободно циркулирующую ДНК плода. Анализ осуществляется по технологии секвенирования нового поколения (NGS).

Источник

Как проходит ДНК тест на отцовство во время беременности

Статья опубликована: 2018-07-11

Рейтинг: 4 из 5

Технологии генетических исследований позволяют быстро и точно установить отца еще до рождения ребенка. Применяемая инновационная неинвазивная методика является абсолютно безопасной для женщины и плода, поэтому для ее проведения не нужен серьезный медицинский повод, как это было необходимо для проведения БВХ или кордоцентеза.

С помощью анализа клеток ДНК ребенка, которые выделяют из венозной крови женщины, можно точно определить пол ребенка, провести тест ДНК на отцовство во время беременности и диагностировать различные хромосомные аномалии, которые невозможно выявить другими диагностическими методами.

Порядок проведения теста на отцовства во время беременности

Пренатальный тест НИПТ является самым новым, безопасным и высокоточным способом установления отцовства в дородовой период. Традиционные инвазивные способы представляли собой сложную и небезопасную процедуру, при которой образцы биоматериала для анализа отбирались путем полостного проникновения. В результате этого часто возникали осложнения, развивались воспалительные процессы, возникал высокий риск прерывания беременности.

НИПТ исключает все риски и осложнения, для его проведения достаточно сдать кровь из вены. Исследования по специальной технологии позволяют абсолютно точно установить, приходится конкретный мужчина биологическим отцом ребенку, или нет.

Главным условием такого тестирования является срок – не раньше седьмой недели беременности. В этот период в плазме женщины находится достаточное для точного анализа количество свободной ДНК плода – не менее десяти процентов.

Тестирование такого уровня проводят только специализированные учреждения. Пройти его можно в ДНК лаборатории ДТЛ, специализацией которой являются все виды генетических исследований. Поскольку каждый случай проведения анализов является индивидуальным, можно предварительно получить бесплатную консультацию, позвонив нашим специалистам в Санкт-Петербурге или заказав обратный звонок.

Как проходит дородовой ДНК тест

Сама процедура тестирования проходит в таком порядке:

• Забор образца крови из вены – производится в ДНК лаборатории СПБ ДТЛ или в любой другой клинике, после чего образцы отправляются к нам на исследование.
• Забор биологического материала у предполагаемого отца. Это может быть как буккальный эпителий, так и другие образцы стандартного и нестандартного типа – пятна крови, окурки, волосы с корешками, обрезки ногтей и т.д., благодаря чему дородовый тест на отцовство можно проводить анонимно. Для забора клеток эпителия в домашних условиях мы предоставляем бесплатный набор.
• В лабораторных условиях проводится очищение и выделение ДНК, после чего сравниваются локусы. Вероятность отцовства возрастает с количеством выявленных идентичных участков.
• Составляется письменное заключение, в котором указывается вероятность отцовства с точностью 99,999999%. При отрицательном ответе точность составляет 100,0%.

Использование оборудования мирового уровня, исследование каждого образца двумя группами экспертов-генетиков позволяет получить объективный и максимально точный результат и полностью исключает ошибки.

Источник

Неинвазивный способ определения отцовства при беременности

ДНК-тест на отцовство/материнство позволяет установить, является ли мужчина/женщина биологическим отцом/матерью конкретного ребенка или нет. В основе молекулярно-генетического метода исследования лежит идентификация аллелей ряда полиморфных локусов, уникально наследуемых ребенком от биологических родителей. Исследованию подвергается ДНК, выделенная из биологического материала, полученного от обследуемых лиц. У каждого человека клетки биологического материала (кровь, слюна, кости, кожа, мышцы, зубы, луковицы волос и др.) содержат абсолютно одинаковую ДНК. Она остается постоянной на протяжении всей жизни, не подвергаясь изменениям. Поэтому результаты молекулярно-генетического исследования не зависят от того, какой именно биологический материал исследуется в конкретном случае.
Типирование полиморфных STR-локусов хромосомной ДНК проводят с помощью полимеразной цепной реакции с использованием энзиматической амплификации 25-локусной панели VeriFiler™ Express PCR Amplification Kit (ThermoFisher Scientific, США), руководствуясь методическими указаниями №98/253 «Использование индивидуализирующих систем на основе полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ПДАФ) ДНК в судебно-медицинской экспертизе идентификации личности и установления родства» (утверждены Минздравом РФ 19.01.1999 г.) и инструкциями фирмы-изготовителя.
Выявленные аллели исследованных локусов обозначаются в соответствии со стандартной международной номенклатурой, что позволяет при необходимости проводить межлабораторные сравнения полученных результатов.
Использование образца биологической матери (родство которой не оспаривается) значительно повышает точность анализа.
Возможны два варианта результата анализа: (1) «исключение отцовства/материнства» и (2) «неисключение отцовства/материнства». Вероятность при «неисключении отцовства/материнства» 99,9999 % и выше (точность 100 % при неисключении отцовства/материнства теоретически недостижима). При наличии совпадающих аллелей по всем исследованным локусам у ребенка и предполагаемого отца делается вывод о возможности получения ребенком наследственного материала от обследуемого: «неисключение» отцовства/материнства.
Вероятность при исключении отцовства/материнства составляет 100 %. Вывод об исключении отцовства/материнства делается, если в генотипах ребенка и предполагаемого отца/матери отсутствуют совпадающие аллели даже по отдельным локусам.

* 2 участника: ребенок и предполагаемый родитель.

ПДАФ-анализ STR-локусов ДНК.

Что такое генетическое установление отцовства/материнства?

Установление отцовства/материнства означает доказательство генетическими методами того, что предполагаемый отец ребенка приходится ему биологическим отцом.

Сравнение генетических STR-профилей (STR — Short Tandem Repeats) на основе генотипирования по 16 локусам с использованием наборов AmpFSTR® Profiler Plus® PCR Amplification Kit и GORDIZ CoDIS-18 на автоматическом секвенаторе GE Healthcare Life Sciences MegaBACE 1000. Проводится дополнительное подтверждающее исследование до 20 локусов при полученной недостаточной вероятности. Метод соответствует требованиям, установленным в судебно-медицинской экспертизе. Возможны юридически доказательное или анонимное исследования. Гарантированная вероятность при подтверждении родства: не менее 99,75 %.

Какой материал используется для генетического тестирования?

В качестве материала для проведения анализа можно использовать кровь и соскоб буккального эпителия (клетки слизистой с внутренней стороны щеки). Также можно использовать волос с волосяной луковицей или даже сухое пятно крови, что позволит провести анализ, не подвергая ребенка медицинским манипуляциям. Из собранных биологических образцов выделяется ДНК и исследуется с помощью метода ПЦР (полимеразная цепная реакция). Срок исполнения до 10 суток. Есть возможность провести анализ анонимно.

Тестирование может проводиться в любом возрасте.

Правила наследования генетической информации

1. Ребенок наследует по 2 аллели каждого аутосомного маркера (один от матери, второй от отца)
2. Митохондриальная ДНК наследуется ребенком от матери
3. Ребенок мужского пола наследует отцовский гаплотип по Y-хромосоме

В момент зачатия ребенка происходит слияние яйцеклетки матери и сперматозоида биологического отца, содержащих гаплоидные наборы хромосом (по 23 хромосомы). После оплодотворения эти два гаплоидных набора хромосом формируют диплоидный набор хромосом ребенка (23 пары хромосом). Из них 22 пары аутосом (одинаковых у мужского и женского организма) и две половые хромосомы (Х-хромосома наследуется от матери, а от отца наследуется либо Х-хромосома, либо Y-хромосома). Таким образом, половину генетического материала ребенок получает от матери и другую половину от биологического отца.

Что такое генетическое тестирование?

ДНК-анализ подразумевает непосредственное изучение генетического материала, который ребенок наследует от своих биологических родителей, исходя из теории наследственности Менделя.

Каждая хромосома состоит из ДНК, представляющей собой уникальную для каждого человека последовательность нуклеотидов – генетический код. В последовательности ДНК имеется множество высокополиморфных участков (локусов) – коротких тандемных повторов (short tandem repeat, STR). Это повторы двух или более пар непосредственно примыкающих друг к другу нуклеотидов. Длина короткого тандемного повтора обычно составляет от 2 до 10 пар оснований (например, (CATG)_n), и количество повторов в локусе очень индивидуально. Для установления родства используется исследование количества STR-повторов в локусе. Выявленные варианты (аллели) сравниваются, и таким образом можно определить, что одна аллель досталась ребенку от матери, а вторая от отца. Если аллель ребенка не совпадает ни с одной из двух аллелей отца, биологическое отцовство полностью исключается. Также учитывается вероятность различия аллелей из-за произошедшей мутации (для STR-локусов вероятность ее возникновения составляет от 0,1 до 0,4 %).

Пример анализа по одному STR-локусу. 1. Совпадения размеров локусов у ребенка и предполагаемого отца. 2. Отсутствие совпадения по исследуемому локусу у ребенка и предполагаемого отца.

Современные методы исследования ДНК позволяют установить родство, анализируя STR-последовательности ядерной ДНК и половых хромосом, а также последовательность нуклеотидов в митохондриальной ДНК (для установления родства по женской линии).

Насколько точен генетический тест?

В геноме ребенка могут присутствовать только такие аллели полиморфных локусов, которые обнаруживаются у матери и биологического отца. Поэтому если у ребенка и отца обнаруживается совпадение как минимум по одному аллелю в каждом исследуемом локусе, можно с вероятностью 99,75-99,99 % подтвердить отцовство. Для достижения такой точности исследуется от 16 до 20 различных локусов. При ответе «не является биологическим отцом» точность теста 100 %.

При анализе трех образцов (мать, ребенок, предполагаемый отец) гарантируется минимальное значение вероятности отцовства 99,9 %. В отсутствие матери (исследуются только образцы отца и ребенка) минимальное гарантированное значение несколько меньше – 99,75 %. То есть ошибка возможна лишь в одном случае из 10 000. Отрицательный ответ точен на 100 %.

Источник