Морфология риккетсий способы окраски

6. Морфология, ультраструктура риккетсий.

Риккетсии – это многочисленная группа бактерий–паразитов, наз­ванная именем их первооткрывателя, американского ученого Г. Риккетса, который, установив риккетсиозную природу пятнистой лихорадки Скалистых гор Северной Америки, в 1910 г. погиб в результате внутрилабораторного заражения. Большая часть риккетсий является безвредны­ми бактериями–симбионтами членис­тоногих (клещи, вши, блохи). Некоторые виды вызывают заболевания у человека.

Морфология. Риккетсии – плеоморфные и разнообразные по разме­рам микроорганизмы. Чаще всего име­ют форму коккобактерий, но в мазке вместе с этим встречаются бактериальные, бациллярные и ните­видной формы риккетсии. Грамотрицательные аэробы, активно окисляют глутаминовую кислоту и индефферентны к глюкозе. В организме боль­ного обнаруживаются в цитоплазме и в ядре клеток, являются облигатными внутриклеточными паразитами  на бесклеточных средах не культивируются. Систематическое положение многих видов остаётся спорным.

Строение как и у других бактерий. Имеет оболочку, протоплазму и зернистые включения, ядерная структура представлена зёрнышками, содержит ДНК и РНК.

Различают 2 морфологические формы:

Вегетативная – крупный размер, размножаются внутри клетки, активна.

Покоящаяся – меньше по размерам, обитает в -хоз, но не размножается.

Напр, после перенесённого сыпного тифа покоящиеся формы могут долго находиться в  чка, но при опред условиях они переходят в вегетативные формы, начинают размножаться, вызываю б-нь Брилля (хрон сыпн тиф).

Риккетсии из-за особенностей цтпл им оч маленьким собств обменом в-в. Продукты обмена не выделяются за пределы   явл-ся метаболически зависимыми от -хозяина. Поэтому для культивирования исп  куриного эмбриона, в  членистоногих и на культуре .

Размножаются простым поперечным делением. Выделяют 2 типа деления:

обычное деление a– (кокковидных, по Здродовскому) и b– (палочковидных двузернистых) форм с образованием гомогенных популяций

размножение мицелия дроблением нитевидных d–форм с последующим образованием популяций, состоящих из клеток a- и b-типов.

Тип С занимает промежуточное положение между a-, b- и d-формами, – это удлинённые или изогнутые двузернистые палочки.

Основные способы окраски. По Граму риккетсий окрашиваются отрицательно. Для их дифференциа­ции чаще применяется предложенная П.Ф. Здродовским облегченная мо­дификация способа Пиля – Нельсена: окраска водным фуксином (5 мин) С последующей обработкой мазка 0,01 % раствором соляной кислоты (1 – 3 с) и докрашиванием 0,5 % метиленовым синим (10 с). Обладая относитель­ной кислотоустойчивостью, риккетсий при этом окрашиваются в рубиново – красный цвет и легко обнаруживаются на фоне голубой цитоплазмы или синего ядра клеток. По Романовскому – Гимзе риккетсии окрашиваются в сиреневый цвет; при внеклеточном расположении часто имеют вид би­полярных палочек или гантелек. Спор, капсул и жгутиков не образуют.

7. Морфология, ультраструктура спирохет.

Патогенные спирохеты – спирально извитые, очень тонкие, обла­дающие активной подвижностью бактерии. Состоят из цитоплазматического цилиндра, в составе которого содержится нуклеоид, рибосомы, мезосомы. В отличие от других бактерий в их цитоплазме имеются одна или несколько перекрывающих друг друга периплазматических (осевых) фибрилл, они крепятся ближе к одному из концов и обвивают цитоплазматический цилиндр, т.к. они оч тонкие, то не видны в световой микроскоп. Тело спирохеты покрыто тонкой эластичной внешней оболоч­кой, тесно прилегающей к цитоплазматической мембране.

Спирохеты различают по количеству и форме завитков, х-ру движения, длине и толщине нити, а также по тинкториальным свойствам. Благодаря сократительной способности фибрилл, состоящих из флагеллина, спи­рохеты обладают поступательным, сгибательным и вращательным дви­жением. Эндоспор и капсул спирохеты не образуют, в мазке располага­ются беспорядочно. Грамотрицательны. Окра­шивают их по Романовскому–Гимзе азур–эозином, который позволяет отдифференцировать возбудителей спирохетозов. Подвижность спирохет изучают с помощью фазово–контрастной и темнопольной микроскопии в раздав­ленной капле.

Таксономия, и морфология возбудителей спирохетозов.

По кол-ву и форме завитков, х-ру движ-я и форме концов делятся на 3 рода:

Treponema – им заостр концы, 8-12 завитков, оч подвижны (покачивание или вращение в микроскопе). Явл-ся обязат обитателями полости рта, кишечника (в составе норм мкФ). Но Treponema pallidum (бледная спирохета) вызывает сифилис, имеет штопорообразную форму с 8–12 туго зак­рученными и одинаковыми по амплитуде завитками. По Романов­скому–Гимзе окрашивается в бледно–розовый цвет.

Borrelia – имеет 1 заострённый и 1 тупой конец, два–три неравно­мерно волнистых завитка. Окрашиваются по методу Романовского – Гим­зе в сине–фиолетовый цвет. Вызывают клещевой бореллиоз у чка, Borrelia recurrentis – эпидемический, а другие виды боррелий – эндемический возвратные тифы, или рекурренсы.

Leptospira – имеют S– или С–образную форму, нередко с крючками на концах, около двух десятков мелких завитков. В поперечнике меньше разрешающей силы оптического микроскопа (0,2 мкм), поэтому лучше их изучать в темнопольном микроскопе. По Романовскому – Гимзе окрашиваются в розовый цвет. Вызывают лептоспироз, поражают печень. Заражение от с/х животных и грызунов, испражнения к/х попадают в воду.

Источник

15. Морфология и ультраструктура риккетсий. Морфология и ультраструктура хламидий. Патогенные виды.

Риккетсии и хламидии относятся к классу Rickettsia облигат-ных внутриклеточных паразитов, который делится на два порядка: Rickettsiales и Chlamidiales.

Риккетсии представляют собой мелкие грамотрицательные микроорганизмы, характеризующиеся выраженным полиморфизмом—образуют кокковидные, палочковидные и нитевидные формы (рис. 22). Размеры риккетсии варьируют от 0,5 до 3-4 мкм, длина нитевидных форм достигает 10—40 мкм. Спор и капсул не образуют, окрашиваются по Здродовскому в красный цвет.

Многие виды риккетсий вызывают заболевания человека, называемые риккетсиозами. Это Rickettsia prowazekii (риккетсий Провацека) — возбудитель эпидемического сыпного тифа и Coxiella burneti (коксиелла Бернета) -возбудитель Ку-лихорадки.

Хламидии имеют шаровидную, овоидную или палочковидную форму. Их размеры колеблются в пределах 0,2—1,5 мкм. Морфология и размеры хламидии зависят от стадии их внутриклеточного цикла развития, для которого характерно превращение небольшого шаровидного элементарного образования в крупное инициальное тельце с бинарным делением. Перед делением частицы хламидии обволакиваются образованием, напоминающим бактериальную капсулу. Хламидии окрашиваются»* по Романовскому—Гимзе, грамотрицательны, хорошо видны в прижизненных препаратах при фазово-контрастной микроскопии.

Согласно современным таксономическим представлениям возбудитель хламидиоза относится к семейству Chlamydiacea, которое состоит из двух родов: Chlamydia и Chlamydophila. Род Chlamydia включает патогенный для человека вид С. trachomatis. Род Chlamydophila включает патогенные для человека виды: С pneumoniae и С. psittaci.

16. Морфология и ультраструктура спирохет. Классификация, патогенные виды. Методы выделения.

Спирохеты — извитые подвижные бактерии, относящиеся к порядку Spirochaetales, семейству Spirochaetaceae. Патогенные спирохеты принадлежат к трем родам: Borrelia, Treponema, Leptospira.

Клетка спирохеты имеет цилиндрическую извитую форму, содержит цитоплазму, отграниченную цитоплазматической мембраной,, снаружи которой расположена клеточная стенка со слабовыраженным пептидогликановым слоем. Патогенные спирохеты имеют длину 3—20 мкм и толщину 0,1-0,5 мкм. Представители отдельных родов различаются по длине и толщине, числу и характеру завитков (табл. 2; рис. 21). Спирохеты грамотрицательны. Боррелии в отличие от трепо-нем и лептоспир хорошо окрашиваются анилиновыми красителями. Морфологию трепонем и лептоспир изучают путем микроскопии живых микроорганизмов в препаратах «раздавленная» или «висячая» капля в темнопольном или фазово-контрастном микроскопе, а также в мазках, окрашенных по Романовскому—Гимзе или специальными методами, например серебрением.

По Гимза, спирохеты возвратного тифа окрашиваются в фиолетово-синий цвет, а бледная спирохета—в красновато-розовый, что зависит повидимому от различий в биохим. составе спирохет.

17. Морфология и ультраструктура микоплазм. Патогенные для человека виды.

Микоплазмы — мелкие бактерии, окруженные только цитоплазматической мембра­ной. Они относятся к классу Mollicutes, содержат стеролы. Из-за отсутствия клеточной стенки мико­плазмы осмотически чувствительны.

Имеют раз­нообразную форму: кокковидную, нитевидную, колбовидную. Эти формы видны при фазово-кон-трастной микроскопии чистых культур микоплазм. На плотной питательной среде микоплазмы обра­зуют колонии, напоминающие яичницу-глазунью: центральная непрозрачная часть, погруженная в среду, и просвечивающая периферия в виде круга.

Микоплазмы вызывают у человека атипич­ную пневмонию (Mycoplasma pneumoniae) и поражения мочеполового тракта (М. homi—nis и др.). Микоплазмы вызывают заболева­ния не только у животных, но и у растений. Достаточно широко распространены и непа­тогенные представители.

L-формы бактерий, их медицинское значение

L-формы — это бактерии, полностью или частично лишенные клеточной стенки (протопласт +/- остаток клеточной стенки), поэтому имеют своеобразную морфологию в виде крупных и мелких сферических клеток. Способны к размножению.

Отличие микоплазм от L-форм бактерий. Микоплазмы не трансформируются в исходные формы.

Источник

Морфология риккетсий способы окраски

Риккетсии – мелкие (0,35-1.0 мкм) грамотрицательные, полиморфные бактерии, являющиеся облигатными внутриклеточными паразитами. Риккетсии разнообразны по форме и выделяют следующие типы:

1. кокковидные однозернистые (до 0,5 мкм);
2. палочковидные двухзернистые (1-1,5 мкм);
3. бациллярные трех-четырехзернистые (3-4 мкм);
4. нитевидные многозернистые (10-40 мкм).

Зерна (нуклеопротеиды) обнаруживаются при окраске по Романовскому-Гимзе. Все формы взаимообратимы. Структурно имеют все компоненты бактериальной клетки: клеточную стенку, липоидную капсулу, цитоплазму, нуклеоид, рибосомы, пили. Риккетсии содержат как ДНК, так и РНК, обладают высоким содержанием фосфолипидов, содержание углеводов невелико. В большинстве случаев (кроме вида Rochalimaea guintana) на искусственных питательных средах риккетсии не растут. Жизненный цикл риккетсий зависит от жизнедеятельности клетки-хозяина и складывается из двух стадий: вегетативной и покоящейся (элементарные тельца). Риккетсии, находящиеся в вегетативной стадии (рис. 23) активно размножаются путем бинарного деления и обладают активной подвижностью, по-видимому, обусловленной жгутиковыми структурами. Риккетсии покоящейся стадии (элементарные тельца) имеют сферическую форму и они не активны. Риккетсии способны к биосинтезу белка, но не могут самостоятельно получать макроэргические соединения, поэтому их можно назвать «энергетическими паразитами» клеток-эукариотов. В связи с этим, для культивирования риккетсий обычно заражают куриные эмбрионы в желточный мешок (метод Кокса), культуры клеток, в которых некоторые виды риккетсий образуют, как и вирусы, тельца включений. Реже заражают чувствительных лабораторных животных: морских свинок, белых мышей. Порядок Rickettsiales включает виды патогенные для теплокровных животных и человека, переносчиками служат вши, блохи, клещи. Заболевания называются риккетсиозами. Большинство болезнетворных для человека видов риккетсий входит в состав семейства Rickettsiaceae, роды Rickettsia, Rochalimaea, Coxiella, вызывая эпидемический сыпной тиф (Rickettsia prowazekii), Ку-лихорадку (Coxiella burnetti), волынскую лихорадку (Rochalimaea guintana), лихорадку цуцугамуши (Rickettsia tsutsugamushi) и другие. Паразитирующие виды ассоциированы с ретикулоэндотелиальными клетками и клетками эндотелия сосудов или эритроцитами.

Методы исследования. Риккетсии хорошо окрашиваются по Романовскому-Гимзе в сиреневый цвет, по Морозову (методом серебрения) в черный цвет. NB! Для дифференциации риккетсий применяется метод окраски, предложенный П.Ф. Здродовским:

1. Тонкие фиксированные мазки окрашиваются водным карболфуксином (из расчета 10 капель карболового фуксина Циля на 10 мл фосфатного буфера рН – 7,4) в течение 5 мин.
2. Мазок промывают водой и обрабатывают 0,5% раствором лимонной кислоты (1-3 сек).
3. Хорошо промывают водой и докрашивают 10 сек, 0,5% водным раствором метиленового синего.
4. Промывают водой и высушивают.

Риккетсии окрашиваются в рубиново-красный цвет и легко обнаруживаются на фоне голубой цитоплазмы и синего ядра клеток.

Источник

6. Морфология, ультраструктура риккетсий.

Риккетсии – это многочисленная группа бактерий–паразитов, наз­ванная именем их первооткрывателя, американского ученого Г. Риккетса, который, установив риккетсиозную природу пятнистой лихорадки Скалистых гор Северной Америки, в 1910 г. погиб в результате внутрилабораторного заражения. Большая часть риккетсий является безвредны­ми бактериями–симбионтами членис­тоногих (клещи, вши, блохи). Некоторые виды вызывают заболевания у человека.

Морфология. Риккетсии – плеоморфные и разнообразные по разме­рам микроорганизмы. Чаще всего име­ют форму коккобактерий, но в мазке вместе с этим встречаются бактериальные, бациллярные и ните­видной формы риккетсии. Грамотрицательные аэробы, активно окисляют глутаминовую кислоту и индефферентны к глюкозе. В организме боль­ного обнаруживаются в цитоплазме и в ядре клеток, являются облигатными внутриклеточными паразитами  на бесклеточных средах не культивируются. Систематическое положение многих видов остаётся спорным.

Строение как и у других бактерий. Имеет оболочку, протоплазму и зернистые включения, ядерная структура представлена зёрнышками, содержит ДНК и РНК.

Различают 2 морфологические формы:

Вегетативная – крупный размер, размножаются внутри клетки, активна.

Покоящаяся – меньше по размерам, обитает в -хоз, но не размножается.

Напр, после перенесённого сыпного тифа покоящиеся формы могут долго находиться в  чка, но при опред условиях они переходят в вегетативные формы, начинают размножаться, вызываю б-нь Брилля (хрон сыпн тиф).

Риккетсии из-за особенностей цтпл им оч маленьким собств обменом в-в. Продукты обмена не выделяются за пределы   явл-ся метаболически зависимыми от -хозяина. Поэтому для культивирования исп  куриного эмбриона, в  членистоногих и на культуре .

Размножаются простым поперечным делением. Выделяют 2 типа деления:

обычное деление a– (кокковидных, по Здродовскому) и b– (палочковидных двузернистых) форм с образованием гомогенных популяций

размножение мицелия дроблением нитевидных d–форм с последующим образованием популяций, состоящих из клеток a- и b-типов.

Тип С занимает промежуточное положение между a-, b- и d-формами, – это удлинённые или изогнутые двузернистые палочки.

Основные способы окраски. По Граму риккетсий окрашиваются отрицательно. Для их дифференциа­ции чаще применяется предложенная П.Ф. Здродовским облегченная мо­дификация способа Пиля – Нельсена: окраска водным фуксином (5 мин) С последующей обработкой мазка 0,01 % раствором соляной кислоты (1 – 3 с) и докрашиванием 0,5 % метиленовым синим (10 с). Обладая относитель­ной кислотоустойчивостью, риккетсий при этом окрашиваются в рубиново – красный цвет и легко обнаруживаются на фоне голубой цитоплазмы или синего ядра клеток. По Романовскому – Гимзе риккетсии окрашиваются в сиреневый цвет; при внеклеточном расположении часто имеют вид би­полярных палочек или гантелек. Спор, капсул и жгутиков не образуют.

7. Морфология, ультраструктура спирохет.

Патогенные спирохеты – спирально извитые, очень тонкие, обла­дающие активной подвижностью бактерии. Состоят из цитоплазматического цилиндра, в составе которого содержится нуклеоид, рибосомы, мезосомы. В отличие от других бактерий в их цитоплазме имеются одна или несколько перекрывающих друг друга периплазматических (осевых) фибрилл, они крепятся ближе к одному из концов и обвивают цитоплазматический цилиндр, т.к. они оч тонкие, то не видны в световой микроскоп. Тело спирохеты покрыто тонкой эластичной внешней оболоч­кой, тесно прилегающей к цитоплазматической мембране.

Спирохеты различают по количеству и форме завитков, х-ру движения, длине и толщине нити, а также по тинкториальным свойствам. Благодаря сократительной способности фибрилл, состоящих из флагеллина, спи­рохеты обладают поступательным, сгибательным и вращательным дви­жением. Эндоспор и капсул спирохеты не образуют, в мазке располага­ются беспорядочно. Грамотрицательны. Окра­шивают их по Романовскому–Гимзе азур–эозином, который позволяет отдифференцировать возбудителей спирохетозов. Подвижность спирохет изучают с помощью фазово–контрастной и темнопольной микроскопии в раздав­ленной капле.

Таксономия, и морфология возбудителей спирохетозов.

По кол-ву и форме завитков, х-ру движ-я и форме концов делятся на 3 рода:

Treponema – им заостр концы, 8-12 завитков, оч подвижны (покачивание или вращение в микроскопе). Явл-ся обязат обитателями полости рта, кишечника (в составе норм мкФ). Но Treponema pallidum (бледная спирохета) вызывает сифилис, имеет штопорообразную форму с 8–12 туго зак­рученными и одинаковыми по амплитуде завитками. По Романов­скому–Гимзе окрашивается в бледно–розовый цвет.

Borrelia – имеет 1 заострённый и 1 тупой конец, два–три неравно­мерно волнистых завитка. Окрашиваются по методу Романовского – Гим­зе в сине–фиолетовый цвет. Вызывают клещевой бореллиоз у чка, Borrelia recurrentis – эпидемический, а другие виды боррелий – эндемический возвратные тифы, или рекурренсы.

Leptospira – имеют S– или С–образную форму, нередко с крючками на концах, около двух десятков мелких завитков. В поперечнике меньше разрешающей силы оптического микроскопа (0,2 мкм), поэтому лучше их изучать в темнопольном микроскопе. По Романовскому – Гимзе окрашиваются в розовый цвет. Вызывают лептоспироз, поражают печень. Заражение от с/х животных и грызунов, испражнения к/х попадают в воду.

Источник