Способы определения примесей
Общие испытания на примеси неорганических ионов
Общие фармакопейные требования к испытаниям на чистоту
ГФ рекомендует как методики и способы испытаний для предварительного определения примеси (косвенные показатели чистоты), так и методики непосредственного определения конкретной примеси.
Физические свойства, физические константы и растворимость в различных растворителях косвенно позволяют судить о доброкачественности лекарственных веществ.
Например: в разделе описание проверяют цвет препарата, форму кристаллов, вкус, запах. Наличие примеси в препарате может изменить эти показатели. Пример: сульфат меди с пятью молекулами воды – это призматические кристаллы голубого цвета. Наличие белых вкраплений говорит о наличии сульфата меди без кристаллизационной воды, которые представляют собой кристаллы белого цвета.
Растворимость, например, натриевых солей лекарственных веществ уменьшается в результате появления примеси соответствующей кислоты, образующейся при гидролизе препарата.
Изменение Тпл. препарата так же означает наличие в нем примесей. Присутствие даже небольшого содержания примесей изменяет (как правило, снижает) температуру плавления вещества, что позволяет судить о степени его чистоты.
Методики определения примесей неорганических ионов (сульфаты, хлориды, мышьяк, тяжёлые металлы) приведены в ОФС «Испытания на чистоту и допустимые пределы примесей».
Чистоту лекарственных веществ устанавливают двумя способами:
1. С помощью специфичных и высокочувствительных химических реакций, приведенных в ОФС с указанием предельной чувствительности каждой реакции (например: предельная чувствительность реакции на ион кальция с оксалатом аммония — 0,0035 мг иона кальция в 1 мл раствора);
2. Физико-химическими методами (например: ТСХ, ФЭК, СПФ).
1. Эталонный способ — основан на сравнении исследуемого раствора с эталонным раствором, содержащем определенное количество открываемой примеси.
Эталонные растворы готовят из стандартных образцов соответствующих веществ, взвешивая массу с точностью до 1 мг и растворяя ее в воде очищенной в мерной колбе. Содержание вещества в эталоне должно быть близким к чувствительности реакции используемой для обнаружения примеси.
Испытуемые растворы готовят по методикам частных ФС. Содержание препарата в этих растворах рассчитывают таким образом, что при наличии в них предельно допустимой массы примеси ее массовая доля в % в испытуемом растворе и эталонном будет приблизительно равной. В растворах лекарственных веществ, отвечающих требованиям ФС, опалесценция или окраска не должна быть интенсивнее, чем в эталоне.
Методика: берут 2 пробирки одинакового стекла и диаметра. В первую помещают 10 мл раствора исследуемого вещества. Навеску препарата взвешивают с точностью до 0,01 г, растворяют в воде очищенной согласно частной ФС. Во вторую помещают 10 мл эталонного раствора. Затем в обе пробирки одновременно добавляют не основные, а затем основные реактивы в одинаковых количествах, перемешивают и через 5 минут сравнивают интенсивность появившейся опалесценции в проходящем свете на темном фоне. Опалесценция, появившаяся в испытуемом растворе не должна быть интенсивнее, чем в эталоне. Если для испытаний использовалась цветная реакция, то наблюдают появление окрашивания в испытуемом растворе при отраженном свете на матово-белом фоне.
2. Безэталонный способ – это установление предела содержания примеси по отсутствию положительной реакции. При этом предел содержания примеси не превышает чувствительности реакции. Если примесь недопустима, то в частной ФС указывается, что раствор, приготовленный из испытуемого лекарственного вещества, не должен давать положительной реакции на определяемую примесь. Это свидетельствует о том, что допустимое содержание данной примеси ниже предела чувствительности используемой реакции. При выполнении испытания в таких случаях не применяют эталонные растворы.
Эталоном служит приготовленный по методике ФС раствор испытуемого вещества после прибавления к нему всех реактивов, кроме основного реагента, открывающего данную примесь.
Методика: берут 2 пробирки одинакового стекла и диаметра. В первую помещают 10 мл испытуемого раствора, добавляют вспомогательные реактивы. Затем половину этого раствора помещают во вторую пробирку. Далее, к одной из частей добавляют основной реактив, дающий положительную реакцию на данную примесь. После перемешивания не должно быть заметных различий в окраске или прозрачности между эталонным и испытуемом растворами.
Требования ГФ к выполнению испытаний на чистоту:
1) достаточная степень чистоты воды, растворов и реактивов;
2) точность навесок до 0,001 г;
3) одинаковые диаметры и цвет стекла посуды;
4) одинаковые объемы реактивов;
5) одинаковая последовательность и скорость прибавления реактивов;
6) одинаковые условия наблюдения результатов испытаний.
Источник
БЕЗЭТАЛОННЫЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРЕДЕЛА СОДЕРЖАНИЯ ОБЩИХ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ПРИМЕСЕЙ
С методологической точки зрения безэталонный метод можно рассматривать как предельный случай эталонного метода. Действительно, положительная реакция на данную примесь указывает на то, что концентрация примеси в испытуемом растворе больше, чем чувствительность этой реакции и наоборот, отсутствие качественной реакции указывает на то, что она меньше, чувствительности реакции. Решая вопрос о наличии или отсутствии качественной реакции испытуемый раствор после добавления к нему реактива, вызывающего качественную реакцию, также сравнивают, но не с эталонным раствором, а с испытуемым, к которому добавлены все реактивы, за исключением последнего, вызывающего качественную реакцию. Такое сравнение необходимо, чтобы компенсировать мутность или цветность, присущие испытуемому раствору. На рисунке 2 приведена схема приготовления раствора примеси для испытания безэталонным методом.
Р и с. 2. Схема приготовления испытуемого раствора примеси
в безэталонном методе
Если в ФС говорится о том, что испытуемый раствор, приготовленный определенным образом, не должен давать реакции на данную примесь, это не значит, что она полностью отсутствует в препарате. В этом случае также нормируется предел содержания примеси в препарате, но не в виде численного значения, а как проявление в определенных условиях испытания.
Очевидно, что если известна чувствительность качественной реакции на данную примесь, то численное значение предела содержания этой примеси в препарате может быть вычислено по уравнению 15 аналогичному уравнению 6, где приведенные величины имеют указанный ранее смысл:
Более того, нормированный таким способом предел содержания данной примеси может иметь большую величину, чем выраженный численным значением. Для иллюстрации этого положения рассмотрим нормативные требования на хлорпропамид (ГФХ, ФС 162). Предел содержания хлоридов в хлорпропамиде задан числом, а предел содержания сульфатов задан как проявление в определенных условииях испытания, а именно: «Хлориды. 0,3 г препарата взбалтывают с 30 мл воды и фильтруют. 10 мл полученного фильтрата должны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,02% в препарате). Сульфаты. 10 мл того же фильтрата не должны давать реакции на сульфаты.»
Расчет численного значения предела содержания сульфатов в хлорпропамиде по уравнению 15 дает следующую величину:
СН = 0,0003·30·1 / 0,3 = 0,03%,
где: 0,0003 – чувствительность реакции на сульфат-ион, 30 – объем воды, взятый для приготовления раствора, 1 – разведение, 0,3 – навеска препарата.
Видно, что нормированный предел содержания сульфатов в хлорпропамиде, хотя и не задан числом, в 1,5 раза больше, чем предел содержания хлоридов в нем. Рассмотренный нами пример еще раз подчеркивает ту мысль, что оба фармакопейных метода контроля чистоты — эталонный и безэталонный, служат для решения одной и той же задачи; а именно, для контроля пределов содержания примесей в лекарственных веществах.
Источник
Определение общих примесей (ионов)
При проведении испытаний на общие примеси используют химические реакции и систему эталонных растворов. Благодаря эталонным растворам ускоряется исследование и увеличивается точность (относительная ошибка метода ± 10 %).
ГФ использует 2 основных способа определения содержания примесей:
эталонный (если установлена ФС ПДК, например, в препарате «Меди сульфат» хлоридов должно быть не более 0,005%) и
безэталонный (если примеси не должно быть).
Эталон – это образец, содержащий определенное, точно известное количество открываемой примеси, которое является пределом ее содержания, применяющийся для определения присутствия примесей в ЛП и приблизительной оценки их количества.
Для приготовления эталонных растворов используется система поэтапного (двойного, тройного) разведения.
Сравнение результатов испытания в анализируемом веществе и эталоне проводится либо:
нефелометрически (сравнивается степень мутности), либо
колориметрически (сравнивается степень окраски).
Для достижения максимальной точности при работе с эталоном необходимо знать общие правила, порядок выполнения которых описывается в ГФ ХI вып.1 статья «Испытания на чистоту и допустимые пределы примесей», (ГФ ХII вып.1):
вода и реактивы должны быть свободны от ионов, на которые проводится реакция
пробирки для анализа должны быть бесцветны и одинакового диаметра, чтобы столб жидкости был одинаковым в обеих пробирках.
навески для приготовления эталонных растворов отвешивают с точностью до 0,001 из соответствуюших ФС исходных веществ (чаще ОФС) и на веска должна быть не менее 0,05г.
Готовят растворы А (исходные) более высокой концентрации (для длительного хранения) и затем из них разбавлением растворы Б (первое разведение) и В (второе разведение). Эталоны Б и В готовят непосредственно перед применением – это рабочие растворы. Концентрации открываемых ионов в эталонах достаточно малы, поэтому сначала в большинстве случаев готовят раствор А, т.к. навеска для приготовления этого раствора такова, что ее можно взвесить с необходимой точностью и этот раствор хранится продолжительное время.
реактивы к растворам (исследуемому и эталонному) добавляют одновременно и в одинаковых количествах.
проведение наблюдения результатов: степень мутности (нефелометрически) проводят в проходящем свете на темном фоне; окраску (колорометрически) – при дневном отраженном свете на белом фоне
безэталонный способ определения примесей используется для тех, которые «не должны быть» обнаружены в препарате по частной ФС.
Методика: к 10 мл исследуемого раствора лекарственного вещества прибавляют все реактивы, кроме основного, открывающего данную примесь. Затем раствор разливают на 2 пробирки, в одну прибавляют реактив и сравнивают растворы в обеих пробирках. Если различия между пробирками нет, то говорят, что примесь отсутствует в пределах чувствительности данной реакции. Чувствительность реакции должна быть ниже предела обнаружения примеси.
Очень важно знать оптимальные условия проведения реакций (рН среды и т.д.), так как соблюдение их значительно повышает все вышеперечисленные требования.
Какие же общие примеси и какими реакциями обнаруживаются эталонным методом? Какое вещество является исходным, при каких условиях проводят реакцию и какой может быть эффект в эталоне и исследуемом растворе препарата? Что является основным реактивом?
Общие примеси: хлориды, сульфаты, ионы аммония, кальция, железа (II и III), цинка, соли тяжелых металлов, мышьяк.
Источник
Способы определения примесей
1. Эталонный способ — основан на сравнении исследуемого раствора с эталонным раствором, содержащем определенное количество открываемой примеси.
Эталонные растворы готовят из стандартных образцов соответствующих веществ, взвешивая массу с точностью до 1 мг и растворяя ее в воде очищенной в мерной колбе. Содержание вещества в эталоне должно быть близким к чувствительности реакции используемой для обнаружения примеси.
Испытуемые растворы готовят по методикам частных ФС. Содержание препарата в этих растворах рассчитывают таким образом, что при наличии в них предельно допустимой массы примеси ее массовая доля в % в испытуемом растворе и эталонном будет приблизительно равной. В растворах лекарственных веществ, отвечающих требованиям ФС, опалесценция или окраска не должна быть интенсивнее, чем в эталоне.
Методика: берут 2 пробирки одинакового стекла и диаметра. В первую помещают 10 мл раствора исследуемого вещества. Навеску препарата взвешивают с точностью до 0,01 г, растворяют в воде очищенной согласно частной ФС. Во вторую помещают 10 мл эталонного раствора. Затем в обе пробирки одновременно добавляют не основные, а затем основные реактивы в одинаковых количествах, перемешивают и через 5 минут сравнивают интенсивность появившейся опалесценции в проходящем свете на темном фоне. Опалесценция, появившаяся в испытуемом растворе не должна быть интенсивнее, чем в эталоне. Если для испытаний использовалась цветная реакция, то наблюдают появление окрашивания в испытуемом растворе при отраженном свете на матово-белом фоне.
2. Безэталонный способ – это установление предела содержания примеси по отсутствию положительной реакции. При этом предел содержания примеси не превышает чувствительности реакции. Если примесь недопустима, то в частной ФС указывается, что раствор, приготовленный из испытуемого лекарственного вещества, не должен давать положительной реакции на определяемую примесь. Это свидетельствует о том, что допустимое содержание данной примеси ниже предела чувствительности используемой реакции. При выполнении испытания в таких случаях не применяют эталонные растворы.
Эталоном служит приготовленный по методике ФС раствор испытуемого вещества после прибавления к нему всех реактивов, кроме основного реагента, открывающего данную примесь.
Методика: берут 2 пробирки одинакового стекла и диаметра. В первую помещают 10 мл испытуемого раствора, добавляют вспомогательные реактивы. Затем половину этого раствора помещают во вторую пробирку. Далее, к одной из частей добавляют основной реактив, дающий положительную реакцию на данную примесь. После перемешивания не должно быть заметных различий в окраске или прозрачности между эталонным и испытуемом растворами.
Требования ГФ к выполнению испытаний на чистоту:
1) достаточная степень чистоты воды, растворов и реактивов;
2) точность навесок до 0,001 г;
3) одинаковые диаметры и цвет стекла посуды;
4) одинаковые объемы реактивов;
5) одинаковая последовательность и скорость прибавления реактивов;
6) одинаковые условия наблюдения результатов испытаний.
Дата добавления: 2014-12-15 ; просмотров: 25 | Нарушение авторских прав
Источник
