Асептический способ отбора проб

Асептический отбор проб — Aseptic sampling

Асептический отбор проб — это процесс асептического извлечения материалов, используемых в биофармацевтических процессах для анализа, чтобы не загрязнить или изменить образец или источник образца. Асептические образцы отбираются на протяжении всего биофармацевтического процесса ( культура клеток / ферментация, подготовка буфера и среды , очистка , окончательное заполнение и обработка). Анализ образца включает стерильность, количество клеток / жизнеспособность клеток, метаболиты, газы, осмоляльность и многое другое.

Содержание

Методы асептического отбора проб

Производители биофармацевтических препаратов широко используют устройства для асептического отбора проб [1] для улучшения асептических методов . Последние инновации в устройствах для отбора проб соответствуют новым тенденциям в области одноразового использования [2], повышают эффективность работы и безопасность оператора.

Устройства для асептического отбора проб под ключ

Устройства для асептического отбора проб «под ключ» — это готовые к использованию устройства для отбора проб, которые практически не требуют подготовки оборудования пользователями. Устройства «под ключ» помогают менеджерам сокращать затраты на рабочую силу, которые, по оценкам, составляют от 75% до 80% стоимости эксплуатации биотехнологического предприятия.

Устройства для асептического отбора проб под ключ включают:

1. Средство для подключения устройства к биотехнологическому оборудованию.
2. Механизм для асептического доступа к материалам, содержащимся в оборудовании биопресса
3. Средство для асептического переноса пробы из оборудования для биотехнологий
4. Сосуд или контейнер для сбора пробы в асептических условиях.
5. Механизм асептического отключения сборного сосуда

Чтобы защитить целостность пробы и гарантировать, что она действительно репрезентативна для времени взятия пробы, путь отбора проб должен быть полностью ограничен и независим от других путей отбора проб.

Устройства для асептического отбора проб на основе канюли (иглы)

В системе асептического отбора проб на основе канюли игла проникает через эластомерную перегородку. Перегородка находится в прямом контакте с жидкостью, поэтому жидкость вытекает из оборудования через иглу. Итерации этого метода используются в производстве медицинских устройств, но обычно не включают оборудование, сочетающее иглу и перегородку. [3] Введение потенциально нестерильной иглы в биотехнологическое оборудование нарушает правила асептики. С помощью устройства для асептического отбора проб на основе канюли [4] игла и перегородки объединены в герметичное устройство для асептического отбора проб.

Источник

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на пищевые продукты и устанавливает методы отбора проб для микробиологических испытаний.

Настоящий стандарт не распространяется на молоко и продукты переработки молока.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 5556-81 Вата медицинская гигроскопическая. Технические условия

ГОСТ 21241-89 Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 25905-83 Фольга алюминиевая для конденсаторов. Технические условия

ГОСТ 29228-91 (ISO 835-2-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 2. Пипетки градуированные без установленного времени ожидания

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии а сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Аппаратура, материалы, реактивы, посуда

3.1 Для отбора проб применяют следующую аппаратуру и материалы:

— горелки газовые или спиртовые по ГОСТ 25336;

— ножи и проволоку из нержавеющей стали;

— скальпели, пинцеты по ГОСТ 21241, шпатели, ложки, половники, долота, пилы из нержавеющей стали;

— пробоотборник (буравчик или зонд);

— посуду широкогорлую с крышкой;

— фольгу металлическую по ГОСТ 25905;

— чашки Петри бактериологические по ГОСТ 25336;

— пакеты полиэтиленовые стерильные;

— вату медицинскую по ГОСТ 5556;

— спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья по ГОСТ 5962;

— пипетки вместимостью 10 и 25 см 3 по ГОСТ 29228;

— посуду с притертой пробкой по ГОСТ 25336;

— пробоотборники специальные для отбора проб из глубины пищевого продукта;

— мешалки из нержавеющего металла;

— термос или изотермическую коробку.

3.2 Посуду, инструменты и материалы, соприкасающиеся с продуктом во время отбора проб, стерилизуют одним из способов:

— насыщенным паром — в течение 30 мин в автоклаве при температуре (121 ± 1) °С;

— горячим воздухом в стерилизаторе:

— с принудительной циркуляцией воздуха при температуре от 170 °С до 175 °С в течение 60 мин;

— без принудительной циркуляции воздуха при температуре от 180 °С до 185 °С в течение 15 мин, при температуре от 160 °С до 165 °С в течение 120 мин.

Допускается обрабатывать инструменты погружением в этиловый спирт с последующим фламбированием.

4 Сущность метода отбора проб

4.1 Микробиологический контроль является выборочным. Объем выборки (количество выборочных единиц) для определения микробиологических показателей безопасности зависит:

— от степени опасности выявляемых микроорганизмов. При выявлении условно-патогенных и патогенных микроорганизмов количество отбираемых проб увеличивается;

— эпидемиологической уязвимости (восприимчивости к инфекции) потребителя, для которого предназначен пищевой продукт. Для продуктов детского и диетического питания количество отбираемых проб увеличивается.

4.2 Объем выборки определяется правилами приемки партии. Для испытания отбирают лабораторную пробу, не поврежденную и не измененную в ходе транспортирования или хранения.

4.3 Каждая отобранная лабораторная проба подвергается микробиологическому испытанию отдельно, при этом допускается использовать планы контроля и оценки качества пищевых продуктов, приведенные в справочном приложении.

4.4 Перед отбором лабораторных проб визуально оценивают внешний вид упаковки выборочных единиц, попавших в выборку, и (или) продукта, содержащегося в выборочных единицах. Визуальную оценку подразделяют на три категории:

— на нормальную по внешнему виду — при осмотре не обнаружены отклонения, вызванные развитием микроорганизмов;

— подозрительную по внешнему виду — при осмотре обнаружено одно или несколько отклонений, которые могли возникнуть как вследствие микробной порчи, так и вследствие химических и биохимических реакций в продукте;

— испорченные продукты — при осмотре обнаружены явные дефекты упаковки выборочных единиц и (или) продукта: бомбаж, хлопуши, брожение, плесневение, гниение, ослизнение, прокисание и другие дефекты.

Отбор проб проводят по каждой вышеперечисленной категории отдельно.

4.5 Основные понятия и общие требования к отбору проб — по нормативно-технической документации на конкретный вид продукта.

Отбор лабораторных проб проводят с учетом требований нормативной документации на конкретный вид продукта.

4.6 Лабораторные пробы продуктов для микробиологических испытаний отбирают до отбора проб для физико-химических и органолептических испытаний.

4.7 Лабораторные пробы продуктов отбирают асептическим способом, исключающим микробное загрязнение продукта из окружающей среды.

4.9 Массу (объем) лабораторной пробы продукта устанавливают в соответствии с нормативно-технической документацией на конкретный вид продукции и она должна быть достаточной для проведения микробиологических испытаний.

4.9.1 Если масса (объем) продукта в потребительской таре меньше массы (объема) лабораторной пробы, то ее формируют из нескольких единиц продукции в потребительской таре (кроме консервов).

— не менее 1 штуки продукции в потребительской таре;

— не более 1000 г (см 3 ) — от продукции кусковой, жидкой, пастообразной, сыпучей и смешанной консистенции, указанной в 4.9.2.

5 Методы отбора лабораторных проб от разных групп продукции

Лабораторные пробы формируют из отбираемых точечных проб.

5.1 Отбор проб от кусковой продукции

5.1.1 Пробы от кусковой продукции массой нетто не более 1000 г отбирают по 4.9.2.

Пробы отбирают ложкой, половником, пинцетом или другим инструментом, в зависимости от вида и размера кусков продукта.

5.1.2 Пробы от кусковой продукции массой не менее 1000 г отбирают одним из следующих методов:

— отрезают или вырезают часть продукта ножом, пилой или другим инструментом. У изделий квадратной формы разрез делают перпендикулярно к грани, у изделий продольной формы — перпендикулярно продольной оси, у шарообразных изделий — клинообразно в соответствии с 4.8;

— продукт в нескольких местах режут ножом, отбирают скальпелем продукт с поверхности разреза и из глубины в соответствии с 4.10;

— срезают поверхностный слой продукта толщиной от 0,5 до 1 см ножом или проволокой, отбирают продукт, находящийся под срезанным слоем, при помощи скальпеля или пробоотборника (буравчика или зонда). При отборе пробы из глубины продукта специальным пробоотборником просверливают продукт в разных местах не менее чем до половины высоты куска. Часть продукта, попавшая в пробоотборник, является точечной пробой;

— от твердого или хрупкого продукта пробы отбирают при помощи долота или другого инструмента. Отбор точечных проб повторяют до тех пор, пока не отберут массу (объем) продукта, необходимую для формирования лабораторной пробы, при этом массу (объем) точечных проб допускается не устанавливать.

5.2 Отбор проб от жидкой или пастообразной продукции

Из емкости вместимостью не более 1000 см 3 пробу отбирают пипеткой или металлическим половником. Если продукт неоднороден по высоте емкости, то содержимое ее перед отбором пробы тщательно перемешивают.

Из емкости вместимостью не менее 1000 см 3 пробу отбирают с различной глубины не менее чем из трех слоев продукта, в одну посуду или каждую пробу в отдельную посуду, в зависимости от цели испытания.

При отборе проб из резервуара, оснащенного краном, кран сначала промывают, вытирают ватой, пропитанной этиловым спиртом, и обжигают в пламени. Предварительно выпускают от 0,1 до 1 дм 3 жидкости (в зависимости от вместимости резервуара и размера диаметра крана) и только после этого отбирают пробы в посуду таким образом, чтобы жидкий (пастообразный) продукт попадал непосредственно в посуду.

Данный метод не применим для отбора проб от продуктов, содержащих спирты.

5.3 Отбор проб от сыпучих продуктов

Пробу от сыпучего продукта отбирают после его тщательного перемешивания мешалкой или половником. Пробу от продукта, который не может быть перемешан, отбирают по 4.9.2.

5.4 Отбор проб от продукции смешанной консистенции

Пробы отбирают таким образом, чтобы в них входили все компоненты в соотношении, в котором они находятся в продукте.

Допускается в зависимости от особенностей анализируемого продукта, цели испытания и предполагаемой микробиологической загрязненности отбирать пробы от каждого компонента отдельно.

6 Транспортирование и хранение

6.1 Каждую отобранную лабораторную пробу маркируют этикетками с указанием наименования продукта, предприятия-изготовителя, номера партии, даты отбора проб (с указанием часа отбора проб), цели микробиологического испытания.

Кроме этого составляют акт, в котором указывают:

— наименование и адрес организации, отбирающей пробу;

— фамилию лиц, отбирающих пробу;

— место, дату и метод отбора проб;

— наименование продукции, от которой отобраны пробы, и дополнительные данные, характеризующие эту продукцию;

— количество взятых проб;

— количество и описание продукции, от которой отобраны пробы;

— подписи и печати удостоверяющие лиц и организации, отбиравших пробы.

6.2 Отобранные пробы, предназначенные для испытания вне предприятия-изготовителя, пломбируют и опечатывают печатью организации, в чьей собственности находится продукция, и транспортируют в лабораторию.

6.3 Пробы замороженных продуктов укладывают в изотермические емкости (термос, изотермическая коробка) или обкладывают сухим льдом (СO₂), или упаковывают другим способом, обеспечивающим сохранение проб в замороженном состоянии при температуре, не превышающей минус 15 °С.

6.4 Пробы консервов и продуктов транспортируют в соответствии с условиями транспортирования продукции, установленными в нормативно-технической документации на конкретный вид продукции.

6.5 Пробы скоропортящихся продуктов транспортируют при температуре плюс 5 °С не более 6 ч, за исключением продуктов, на которые предусмотрены специальные условия, предусмотренные в нормативно-технической документации на конкретный вид продукта.

Приложение А
(справочное)

План контроля и оценки качества пищевых продуктов

А.1 Система двух категорий

При системе двух категорий качество продукта делится на «приемлемое» или «неприемлемое» только на основе одного показателя т. При этом в выборке п не допускается ни одной пробы со значением показателя выше т, то есть с = 0, и система в этом случае имеет вид : п — указывается количество отобранных проб, с = 0. Такая система используется для патогенных микроорганизмов и иногда для условно-патогенных.

А.2 Система трех категорий

При системе трех категорий качество продукта делится на «приемлемое», «условно-приемлемое» или «допустимое» и «неприемлемое» на основе двух показателей т и М. При этом в выборке п допускается определенное число проб с условно-приемлемого уровня качества со значением показателя, находящимся между т и М, и система в этом случае имеет вид: п — указывается количество отобранных проб, с — количество проб с условно-приемлемым уровнем качества. Такая система используется для санитарно-показательных микроорганизмов, микроорганизмов возбудителей порчи и иногда для условно-патогенных микроорганизмов.

Примеры оценки качества пищевых продуктов приведены в таблице А.1

Количество
отобранных
проб п

Количество проб с условно-приемлемым уровнем качества с

Количество
микроорганизмов,
КОЕ в г (см 3 ) продукта

1 Количество мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов, КОЕ в 1 г (см 3 ) продукта

2 Количество мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов, КОЕ в 1 г (см 3 ) продукта

3 Бактерии рода Salmonella в г (см 3 ) продукта

* т — количество микроорганизмов, являющееся нормативным для приемлемого уровня качества (см. показатель 1 таблицы). Ни для одной пробы из пяти отобранных не допускается значение больше т [1,0 · 10 2 КОЕ в 1 г (см 3 ) продукта].

** М — количество микроорганизмов, являющееся пограничным для неприемлемого уровня качества (см. показатель 1 таблицы). Ни для одной пробы из пяти отобранных не допускается значение больше М [1,0 · 10 3 КОЕ в 1 г (см 3 ) продукта].

Если выявленное количество микроорганизмов находится между т и М, это значит, что из пяти отобранных проб в одной пробе (с = 1) допускается количество микроорганизмов от 1,0 · 10 2 до 1,0 · 10 3 КОЕ в 1 г (см 3 ) продукта. При этом уровень качества будет условно-приемлемым.

Ключевые слова: методы отбора проб, микробиологическое испытание, система двух и трех уровней качества, точечная проба, лабораторная проба, транспортирование и хранение проб

Источник