Способ получения антирабического иммуноглобулина
Использование: медицина, производство иммуноглобулина. Доноров 0(1) и А(И) групп крови иммунизируют антирабической вакциной, выделяют из плазмы крови иммуноглобулин , очищают его методом диафильтрации на плоскорамных фильтрах, заправленных полиамидными мембранами на подложке типа УПМ-И и лиофилизуют. Полученный антирабический иммуноглобулин обладает высокоспецифической активностью и содержит вируснейтрализующие антитела в титре не менее 1 50 000. 1 табл.
ГОСУДАР СТВЕ ННЫ Й КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
К ASTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4852152/14 (22) 18.07,90 (46) 07.07,92; Бюл. N 25 (71) Киевский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови (72) Е.А. Федоровская, А.П. Рыбальская, M.À. Селимов. В,Ф, Соболев, А.А. Шинкаренко и В,П. Логвинова (53) 612.015(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР
N 1258417, кл. А 61 К 39/205, 1986.
Изобретение относится к области медицины, а именно к производственнойтрансфузиологии, и предназначено для получения высокоэффективного, длительно сохраняющегося антирабического иммуноглобулина для профилактики и лечения гидрофобии.
Известны способы получения иммуноглобулинов направленного действия; антистафилококкового, противогриппоэного, противостолбнячного, противосинегнойного и др. Известны также способы получения антирабического иммуноглобулина. В основе этих способов лежит иммунизация соответствующими антигенами и выделение иммуноглобулина из плазмы крови.
Наиболее близким к предлагаемому техническому решению является способ получения антирабического иммуноглобу- лина человека, который предусматривает внутримышечное введение донорам концентрированной культуральной антирабической вакцины (КОКАВ) иэ вирусного
„„Я3„„ 1745257 А1 (si)s А 61 К 39/205, G 01 и 33/531 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИРАБИЧЕСКОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА (57) Использование: медицина. производство иммуноглобулина. Доноров 0(l) и A(ll> групп крови иммунизируют антирабической вакциной, выделяют из плазмы крови иммуноглобулин, очищают его методом диафильтрации на плоскорамных фильтрах, заправленных полиамидными мембранами на подложке типа УПМ вЂ” Il и лиофилизуют.
Полученный антирабический иммуноглобулин обладает высокоспецифической активностью и содержит вируснейтрализующие антитела в титре не менее 1:50 000. 1 табл. штамма Внуково 32 — 107, в дозе 1,5 мл на 1, 30, 90 сут, Способ позволяет получить аллогенный антирабический иммуноглобулин с титром вируснейтрализующих антител
Однако техническое решение имеет следующие недостатки: длительность интервалов между введениями вакцины, практически неприемлемая для донорства; большой разброс титров вируснейтрализующих антител (ВНАТ) в сыворотке крови вакцинируемых, в связи с отсутствием целенап равленного подбора контингента доноров, что в свою очередь приводит к получению препарата с нестандартным диапазоном титров в различных сериях; получение препарата в жидкой лекарственной форме (в виде 10% раствора), что сокращает срок его хранения, создает неудобство при транспортировке в очаги эпизООтии.
Целью изобретения является повышение специфической активности, стабильно1745257
55 сти и удлинение сроков хранения аллогенного антирабического иммуноглобулина для внутримышечного введения.
Поставленная цель достигается целенаправленным подбором доноров для иммунизации КОКАВ, относящихся к 0(l), A(ll) группам крови по системе АВО, специально отработанной схемой иммунизации, выделением р-глобулиновой фракции из плазмы крови с последующей ее очис-,кой методом диафильтрации на плоскорамных фильтрах, заправленных полиамидными мембранами на подложке типа УПМ II, и лиофилиэацией препарата на конечном этапе.
Отличительными признаками изобретения являются подбор доноров О(() и A(II) групп крови.для иммунизации, высокореагирующих на введение антирабической вакцины, результаты наблюдений свидетельствуют о значительно более низком уровне специфического иммунного ответа доноров В (ill) и АВ (IV) групп крови; отбор плазмы крови доноров с высоким содержанием вируснейтрализующих антител. Титр
ВНАТ определяется в параллельных исследованиях реакции нейтрализации на белых беспородных мышах и в иммуноэнзиматическом тесте; очистка у -глобулиновой фракции методом диафильтрации нэ плоскорамных фильтрах с полиамидными мембранами на подложке типа УПМ вЂ” II.
Совокупность отличительных признаков дала возможность разработать способ. получения аллогенного антирабического иммуноглобулина в лиофилизированном виде с высоким титром ВНАТ.
Сущность изобретения характеризуется конкретными примерами исполнения.
Пример1. Донор И. Группа крови О(1).
Введение концентрированной культуральной антирабической вакцины в количестве
1,0 мл проводят с соблюдением строгих правил асептики и антисептики в верхний наружный квадрант ягодицы на 0, 7, 15, 30 сут.
На 45 сут в сыворотке крови донора определяют титр BHAT в реакции нейтрализации на белых беспородных мышах и в иммуноэнзиматическом тесте, Результат определения:
1:810. Плазму крови, изъятую методом плаэмафореза фракционируют спиртовым способом в соответствии с действующим регламентом производства 10-16% раствора гамма-глобулина иэ донорской плазмы, Фракционирование иммунной антирабической донорской плазмы проводили по методу Кона в соответствии с регламентом производства раствора гамма-глобулина из донорской плазмы. Для этого осадок белков фракции II+III содержащий гамма-глобулиновую фракцию. выделяют в соответствии с регламентом производства 5, 10 и 20% альбумина, Затем проводят переосаждение белков фракции II+III. Осадок фракции II+III, хранившийся не более трех месяцев при температуре не выше — 20 С, растворяют в предварительно охлажденном до 0 физиологическом растворе из расчета 7,5 обьемов физиологического раствора по отношению к весу осадка, Суспенэию загружают в стеклянный сосуд. помещенный в фракционнь:й стол, при температуре спирта большой ванны-1+» 1, С, Суспензию,при постоянном помешивании охлаждают до 0″ и перемешивают при этой температуре еще два часа. Затем температуру спирта большой ванны фракционного стола понижают до (— 5) -(— 6) С. Су= пензию охлаждают до температуры — 1ЯС. Б мерник медленно заливают предварительно охлажденный до — 15 — -20 С 95% этиловый спирт в количестве 240 мл на 1 л суспензии. Конечная концентрация спирта в смеси 19%.
Смесь перемешивают не менее двух часов при температуре (— 5) — (-6) С (созревание осадка), Затем осадок отделяют центрифугированием в стаканчиковых рефрижераторных центрифугах при температуре (— 5) — (— 6) С и 2700-3000 об/мин в течение 30 мин. Осадок собирают в закрытую емкость и взвешивают, хранят при температуре (— 35) — (— 50) С йе более одного месяца, Получение осадка гамма-глобулина.
Центрифугат загружают в стеклянный сосуд, помещенный во фракционный стол при температуре спирта большой ванны (— 5) — (— 6) С. К раствору добавляют 5 М раствор хлористого натрия из расчета 10 мл на каждый литр центрифугата, устанавливают рН
7,0 — 7,2 путем добавления 4,2% раствора бикарбоната натрия. Затем иэ мерника добавляют охлажденный до температуры (— 15)— (— 20)0С 95% этиловый спирт иэ расчета 160 мл на 1 литр смеси. Конечная концентрация спирта в смеси 26%, Затем смесь перемешивают не менее двух часов, центрифугируют при температуре (-5) — (— 6) С, 2700-3000 об/мин в течение 30 мин и выделяют фракцию!! (осадок В), Выделенную фракцию II (осадок В) суспендируют в охлажденном 0,9% растворе поваренной соли в соотношении вес/обьем 1:2.
Концентрация белка в суспензии составляет
5,0 — 5,5%. Смесь оставляют на длительное время(додвух месяцев)для отстаивания. По истечении этого времени отстоявшуюся жидкость пропускают через мезгу, и освет1745257
55 ленный раствор подвергают диафильтрации, которую проводят на плоскорамных фильтрах, заправленных полиэмидными .мембранами на подложке типа УПМ II.
Продолжительность очистки 10 литров
5 раствора гамма-глобулина на этой установке составляет 4 ч, Очищенный от низкомолекулярных примесей раствор пропускают через стерилизующие фильтры и разливают в ампулы для лиофилизации.
Пример 2.Донор П, Группа крови A(ll), КОКАВ вводили в дозе 1,0 мл по схеме О, 7, 15, 30 сут. На 45 сут определяли титр В НАТ.
Результат определения-титр BHAT 1:516.
Иммуноглобулин получали аналогичным способом.
Пример 3. Донор С„Группа крови
B(IIi), КОКАВ вводили в дозе 1,0 мл по схеме.
0,7,15,30 сут, На 45 сут определяли титр
ВНАТ. Результат определения — титр ВНАТ
1:30, Плазма не пригодна для получения антирабического иммуноглобулина.
Пример 4. Донор К. Группа крови АВ (И). Проведена внутримышечная иммунизация КОКАВ в дозе 1,0 мл по схеме О, 7, 15, 30 сут. На 45 сут определяли титр ВНАТ.
Результат определения — титр ВНАТ 1:45,5.
Плазма не пригодна для получения антирабического иммуноглобулина.
Целевой продукт, полученный в лиофилизированном виде, характеризуется титром ВНАТ 1:54 000.
Результаты распределения уровня
ВНАТ с учетом групповой принадлежности сывороток крови представлены в таблице.
Таким образом, согласно изобретению, разработан способ получения лиофилизированного аллогенного антирабического иммуноглобулина с титром вируснейтралиэующих антител не менее чем 1:50 ООО, Сухой препарат антирэбического иммуноглобулина выпускается в запаянных ампулах и представляет собой таблетку или порошок кремоватого цвета, Предлагаемый способ позволяет получить быстрорастворимый антирабический иммуноглобулин, который хранится при 1822 С и не требует специальных условий при транспортировке в очаги эпизоотий, не подвертается фрагментации в процессЕ хранения, безвреден для организма и пригоден для внутримышечного введения. Сухой иммуноглобулин термостабилен (выдерживает после растворения прогрев при57 С втечение 4 ч), не имеет остаточного спирта, что также исключает денатурацию белка при. хранении.
Воспроизведение способа доступно для производства препаратов крови в условиях заводов бакпрепаратов, станций переливания крови, производство экономически оправдано, не требует специального оборудования. Данный препарат крайне необходим для практического «,дравоохранения.
Пример 5, Стабильность препарата.
Лиофилизированный аллогенный антирабический иммуноглобулин после двух лет хранения при t 16 — 22 С сохранял исходную специфическую активность и физико-химические свойства. Срок годности препарата определяли также при хранении препарата в течение 1 мес при температуре +37 С.
Даннйй метод применяется для изучения стабильности иммунных препаратов различной направленности и предусматривает, что условия хранения в течение трех лет при температуре (+2)-(+10) С равны одному году при температуре (+ I8)-(+22) С и равноценны хранению в течение одного месяца при температуре +37 С.
Результаты исследований свидетельствуют о сохранении специфической активности антирабического донорского иммуноглобулина в титре 1:31180 после хранения при 37 С один месяц, что соответст25 вует 442 МЕ. В то же время известно, что коммерческие препараты донорского иммуноглобулина, применяемые за рубежом с лечебной и профилактической. целью, имеют специфическую активность 150 МЕ.
Таким образом, целевой продукт полностью пригоден к применению в результате двух лет хранения при t (+16) — (+22) С и последующего хранения при t+37 С один месяц, что в общей сложности соответствует трем годам хранения при t (+16) — (+22) С или примерно девяти годам хранения при температуре +4 С, Формула изобретения
Способ получения антирабического иммуноглобулина путем внутримышечного введения концентрированной культуральной антирабической вакцины КОКАВ донорам с последующим выделением целевого продукта из плазмы крови, о т л и ч э ю щ и йс я тем, что, с целью повышения специфической активности целевого продукта, его стабильности и удлинения сроков хранения, вакцину вводят донорам О(1) и А (II) групп крови в объеме 1,0 мл на О, 7, 15, 30 сутки. выделенную из плазмы крови гамма-глобулиновую фракцию отстаивают, подвергают диафильтрации на плоскорамных фильтрах, заправленных полиамидными мембранами на подложке типа УПМ-1, и полученный целевой продукт лиофилиэируют, 1745257
P — сравнение проведено по отношению к 0(l) и А (! 1) группам крови.
Редактор И,Ванюшкина Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор Т.Палий
Заказ 2340 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат «Патент», г. Ужгород, ул.Гагарина, 101
Источник
Научная электронная библиотека
Перетрухина А. Т., Блинова Е. И.,
Глава 2. ПРЕПАРАТЫ, ПРИМЕНЯЕМЫЕ ПРОТИВ БЕШЕНСТВА
Возбудитель бешенства относится к роду Lyssavirus (от греч. lyssa — водобоязнь), семейству Rhabdoviridae.
Вирус бешенства единственный из царства Virae, который поражает всех теплокровных животных, в том числе человека, в глобальном масштабе с летальностью 100 %.
Род Lyssavirus объединяет 7 генотипов и 4 неклассифицированных вируса. 1-й генотип включает вирусы классического бешенства, обозначенные как штаммы уличного (дикого) вируса, выделенные от наземных млекопитающих, насекомоядных, плотоядных и кровососущих летучих мышей, а также фиксированные (вакцинные) штаммы вируса бешенства. Широко распространены в Европе, Азии, Северной и Южной Америке. 2-й генотип (Лагос-Бат) включает вирусы, выделенные от плотоядных летучих мышей, собак и кошек в Центральной и Южной Африке. 3-й генотип (Мокола) выделен от землероек, человека, собак и кошек в Центральной и Южной Африке. 4-й генотип (Дувенхаге) выделен от человека, укушенного летучей мышью, и летучих мышей в Южной Африке и Зимбабве. 5-й генотип (лиссавирус европейских летучих мышей 1-го типа) циркулирует в Европе, в т.ч. в европейской части России. 6-й генотип (лиссавирус европейских летучих мышей 2-го типа) циркулирует в Европе. Выделен также от человека в Финляндии и Шотландии. 7-й генотип выделен от людей в Австралии.
Вирион имеет форму пули размерами 170×70 нм и состоит из несегментированного генома, представленного одной молекулой спирально закрученной РНК негативной полярности и 5 структурных белков, из которых белок N является группоспецифическим антигеном.
РНК не инфекционна, а рибонуклеопротеид, в составе которого находится транскриптаза, обладает инфекционными свойствами.
В составе вириона, помимо РНК-полимеразы, содержится ряд ферментов. Среди них находится протеинкиназа, полиаденилаттрансфераза и другие ферменты.
Для вируса бешенства характерна адаптационная изменчивость, которая была использована Л. Пастером для получения вакцины против бешенства. Уличный вирус бешенства пассировался интрацеребрально на кроликах. По мере пассирования длительный инкубационный период, характерный для инфекции, вызванной уличным вирусом, постепенно сокращался, пока не стал равным 5 дням. Этот вирус был назван фиксированным и при интрацеребральном введении он вызывал 100 % гибель кроликов. Вместе с тем, он потерял патогенные свойства для собаки и человека. Поэтому фиксированный вирус, после дополнительной обработки (высушивание мозга кролика, приводящее к инактивации вируса) был использован в качестве вакцины для лечебно-профилактических прививок.
Бешенство — острое нейровирусное заболевание, передаваемое человеку через укус лисы, собаки, волка и других плотоядных животных, зараженных в природе, в свою очередь, так же — через укус.
После укуса больного животного вирус размножается в мышечной ткани в месте укуса, а затем, достигнув нервных окончаний чувствительных периферических нервов, распространяется центростремительно, достигая двигательных нейронов. Происходит распространение вируса в нервно-мозговой ткани, демиелиницация белого вещества, дегенерация аксонов и миелиновых оболочек. В спинном мозге более всего поражаются задние рога. В цитоплазме пораженных нервных клеток образуются специфические цитоплазматические включения — тельца Бабеши-Негри, которые являются диагностическим признаком болезни. Включения ацидофильны, четко контурированы, имеют сферическую форму с диаметром от 0,25 до 25 мкм, чаще 2-10 мкм. Размножение вируса происходит в слюнных железах. К моменту появления первых клинических признаков бешенства вирус широко диссеминирован во всем организме. В связи с этими особенностями патогенеза инкубационный период при бешенстве продолжителен, и тем продолжительнее, чем дальше от спинного и головного мозга находится место укуса. Под инкубационным периодом подразумевается период времени от момента укуса до появления первых признаков болезни. Он варьирует от 6-7 суток до 6 лет, но описаны примеры инкубационного периода продолжительностью 10, 11, 13 и 19 лет. Средний инкубационный период при бешенстве составляет 1-3 месяца. Таким образом, длительность его зависит от продолжительности репликации вируса в воротах инфекции, места и тяжести укусов, количества попавшегов рану вируса, свойств вируса, количества нервных окончаний на месте укуса, а также структуры популяции штамма вируса.
Заболевание у человека начинается с продромального периода, который длится 2-4 дня и проявляется недомоганием, головной болью, тошнотой, рвотой, повышением температуры. Во входных воротах инфекции нарушается чувствительность. Повышается активность симпатической нервной системы: отмечаются слезотечение, расширение зрачков, потливость, обильное слюноотделение, при глотании — болезненные спазмы. У больного появляется чувство страха, особенно при виде воды. Появляются агрессивность и буйство, конвульсивные судороги, в финальной стадии — параличи, упадок сердечной деятельности и наступает смерть, обычно через 3-5 дней после начала заболевания.
Обычно заболевание имеет летальный исход и поэтому иммунитет после перенесенной инфекции не изучен. После вакцинации людей убитой антирабической вакциной появляются антитела, сохраняющиеся в течение года. Ревакцинация приводит к резкому повышению титра антител.
Лабораторная диагностика включает обнаружение телец
Бабеши-Негри в тканях мозга (посмертная) и выделение вируса молекулярно-генетическими методами ОТ-ПЦР и секвенированием генов N- и G-белков, а также выявление рибонуклеопротеина прямым методом флюоресцирующих моноклональных антител (прижизненная).
Бешенство у человека неизлечимо и всегда заканчивается летальным исходом. Единственный метод борьбы с бешенством —
профилактика. Профилактика состоит из предупреждения инфицирования человека и предупреждения развития бешенства у инфицированного человека. Предупреждение инфицирования включает контроль за численностью основных носителей вируса в природе и бездомных и домашних животных, иммунизацию домашних животных от вируса бешенства. Предупреждение развития бешенства у человека после контакта с бешеным или подозрительным на бешенство животным осуществляется путем оказания немедленной антирабической помощи. Антирабическая помощь состоит из местной обработки раны, введения антирабической вакцины или комплексного применения антирабического иммуноглобулина
и вакцины.
Для лечебно-профилактических прививок в РФ и развитых странах применяются концентрированные, очищенные, высокоиммуногенные культуральные вакцины, приготовленные на различных клеточных субстратах, а также антирабический иммуноглобулин. В развитых странах используется человеческий антирабический иммуноглобулин, а в РФ и третьих странах — лошадиный антирабический иммуноглобулин. При поверхностных укусах и царапинах применяется одна вакцина. В РФ вакцина вводится шестикратно внутримышечно по 1 мл в 0, 3, 7,14, 30, и 90-е сутки. В развитых странах вакцина применяется 5-кратно.
Вакцина антирабическая культуральная концентрированная очищенная инактивированная сухая (Рабивак — «Внуково-32»), лиофилизат для приготовления раствора для внутримышечного введения и антирабического иммуноглобулина (КОКАВ)
Препарат применяется для лечебно-профилактической и профилактической иммунизации человека против бешенства. Вакцина антирабическая культуральная концентрированная очищенная инактивированная сухая, лиофилизат для приготовления раствора для внутримышечного введения представляет собой вакцинный вирус бешенства штамм «Внуково-32», выращенный в первичной культуре клеток почек сирийских хомячков, инактивированный ультрафиолетовыми лучами и формалином, концентрированный методом ультрафильтрации с последующей очисткой методом гельхроматографии.
Вакцина антирабическая — пористая масса белого цвета, гигроскопична.
Одна доза (1,0 мл) вакцины содержит: специфический антиген вируса бешенства штамм «Внуково-32» — не менее 2,5 ME (Международных Единиц) — активный компонент, альбумин — 5,0 мг (раствор для инфузий) — стабилизатор, сахарозу — 75,0 мг — стабилизатор, желатин — 10,0 мг — формообразователь. Препарат не содержит консервантов и антибиотиков.
Вакцина выпускается в комплекте: 1 ампула вакцины по 1,0 мл (1 доза) и 1 ампула растворителя (вода для инъекций) по 1,0 мл. В упаковке содержится 5 комплектов (5 ампул с вакциной и 5 ампул с растворителем).
Вакцина индуцирует выработку иммунитета против бешенства. Вакцинацию проводят по следующей схеме: первичная иммуниза-
ция — 3 инъекции в 0, 7 и 30 день по 1,0 мл; первая ревакцинация через 1 год — 1 инъекция 1,0 мл; последующие ревакцинации через каждые 3 года — по 1 инъекции 1,0 мл.
Вакцину хранят и транспортируют при температуре от 2 до 8 °С. Допускается транспортирование вакцины при температуре до 25 °С в течение не более 2-х суток.
Срок годности вакцины — 2 года.
Сухая антирабическая вакцина типа Ферми
Вакцину изготовляют из мозга овец в возрасте до 1 года, зараженных фиксированным вирусом бешенства.
Для приготовления вакцины по методу Ферми измельченный мозг разводится физиологическим раствором, содержащим 1 % фенола, так, чтобы получить 5 % взвесь. После этого вакцина для инактивации выдерживается в течение 8 дней при 20-22 °С. После инактивации вакцина фильтруется через четырехслойный марлевый фильтр и после проверки стерильности передается в разливку.
Вакцину выпускают в сухом виде. Она представляет собой таблетку беловато-серого цвета. Одна таблетка получается в результате лиофильного высушивания 0,75 мл 10 % вируссодержащей суспензии. В коробку с 5 ампулами сухой вакцины вкладывают 5 ампул, содержащих по 3 мл растворителя — дистиллированной воды. После растворения вакцина представляет собой гомогенную жидкость беловато-серого цвета. Вакцину вводят немедленно после разведения. Хранение разведенной вакцины не допускается.
Срок годности сухой вакцины — 3 года.
Рабипур — инактивированная очищенная вакцина против бешенства
Рабипур — вакцина для постэкспозиционной (после укуса бешеного или подозрительного животного) и профилактической вакцинации против бешенства.
В настоящее время вакцина находится на перерегистации.
Рабипур получают путем выращивания штамма вируса Flury LEP на культуре куриных фибробластов. 1 доза лиофилизированного порошка содержит инактивированный вирус бешенства (штамм Flury LEP) с активностью более 2,5 МЕ. Выпускается во флаконах по 1 дозе, в комплекте с иглой и растворителем в ампулах по 1 мл. Вакцина не содержит консервантов.
Порошок белого цвета, после растворения — бесцветная жидкость.
Хранят при температуре 2-8 °C.
Срок годности — 3 года.
Жидкая антирабическая вакцина МИВП
Вакцина представляет собой 5 % суспензию в 0,96 % растворе фенола головного мозга белых крыс-сосунков, зараженных фиксированным вирусом бешенства, в возрасте 4-8 дней. Этот препарат выпускается в жидком виде.
Срок годности жидкой вакцины — 5 месяцев.
Сухая антирабическая вакцина МИВП
Для приготовления сухой вакцины к 20 % суспензии головного мозга белых крыс-сосунков, инактивированной в фенолизированном физиологическом растворе при 22 °С в течение 14 дней, добавляют равный объем стабилизирующей сахарозо-желатиновой среды, разливают в ампулы по 3 мл и высушивают из замороженного состояния.
В коробку с 10 ампулами сухой вакцины помещают равное количество ампул, содержащих по 3 мл дистиллированной воды, применяемой в качестве растворителя.
Срок годности сухой вакцины — 1 год.
Культуральная антирабическая вакцина
Препарат представляет собой вируссодержащую жидкость, полученную при выращивании фиксированного вируса бешенства на первичной культуре клеток почки сирийских хомяков и частично инактивированную действием фенола. Для приготовления вакцины используется штамм «Сад», идентичный с фиксированным вирусом. Он аттенуирован интрацеребральными пассажами на белых мышах и выращиванием в культуре тканей.
Срок годности вакцины — 1 год.
Антирабический иммуноглобулин из сыворотки лошади
Препарат изготавливается из сыворотки лошадей, гипериммунизированных вирусом бешенства. Выпускается в жидком виде в ампулах и флаконах по 5 и 10 мл. На ампулах и коробках с антирабическим гамма-глобулином, кроме других необходимых данных, указывается титр в международных единицах (МЕ). Активность должна быть не менее 800 МЕ/мл, в коробки вкладывают также ампулы с разведенным в 100 раз препаратом, который применяют для определения чувствительности к лошадиному белку.
По условным показаниям антирабический иммуноглобулин вводят взрослым в дозе 0,25 мл/кг, по безусловным — 0,25-0,5 мл/кг. Всю дозу иммуноглобулина вводят в один день.
Антирабический иммуноглобулин должен храниться при 2-8 °С. Срок хранения — 2 года.
Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови человека
Применяют в комбинации с антирабической вакциной для предупреждения заболевания людей гидрофобией при тяжелых множественных укусах бешеными или подозрительными на бешенство животными.
При повторном множественном укусе больным бешенством или подозрительным на бешенство животным антирабический иммуноглобулин не назначается, если при первом укусе пострадавший получил полный комбинированный курс лечения антирабическим иммуноглобулином и антирабической вакциной.
Препарат представляет собой концентрированный раствор очищенной гамма-глобулиновой фракции сыворотки крови человека, выделенной методом холодовой экстракции этанолом и подвергнутой процессу ультрафильтрации, очистки и вирусной инактивации при значении рН 4,0 и температуре 23-25 °С в течение
21 дня.
В 1 мл содержит специфические антитела к вирусу бешенства, не менее 150 ME; стабилизатор глицин (гликокол) от 20 до 25 мг; натрия хлорид 7 мг; вода для инъекций. Препарат не содержит антибиотиков. HBsAg, антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2 и к вирусу гепатита С отсутствуют. Прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость, бесцветная или светло-желтого цвета.
Препарат вводят в как можно более ранние сроки после обращения однократно в дозе 20 МЕ/кг массы тела взрослого или ребенка. Введение антирабического иммуноглобулина в более поздние сроки, а также, после введения антирабической вакцины не допускается. Дозировка иммуноглобулина не должна превышаться ни при каких обстоятельствах, так как введение повышенной дозы иммуноглобулина может частично подавить продукцию
антител.
Хранение при температуре от 2 до 8 °С в защищенном от света месте. Не допускается замораживание.
Срок годности препарата — 2 года.
Гомологичный антирабический иммуноглобулин из сыворотки людей, иммунизированных против бешенства
Препарат представляет собой прозрачную или слегка опалесцирующую жидкость, бесцветную или имеющую легкую желтую окраску. В 1 мл препарата должно содержаться не менее 40 МЕ антител против бешенства. Доза препарата не менее 160 МЕ/кг.
Срок годности иммуноглобулина — 1 год.
Флюоресцирующий антирабический гамма-глобулин
Для ускоренной индикации антигена вируса бешенства прямым иммунофлюоресцентным методом применяется антирабический гамма-глобулин, химически связанный с флюоресцеинизотиоцианатом. Он сообщает антигену вируса бешенства, фиксированного в отпечатках мозга, яркую специфическую флюоресценцию при разведении конъюгата не ниже 1:8. В отпечатках мозга, содержащего другие гетерологичные вирусы, флюоресценция отсутствует.
Срок годности препарата — 1 год.
Источник
